2.2动物细胞工程.pptVIP

细胞核移植 体细胞 MⅡ中期卵母细胞 去核的卵母细胞 细胞核 重组细胞 重组胚胎 代孕母体 子代个体 去核 注入 诱导融合 胚胎移植 体现了细胞核的全能性 卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 融合后的卵细胞 多莉羊的培育过程 ◆特别注意：克隆动物性状与供体动物完全一样吗？ 不可能！因为： 一、供体动物只提供细胞核，而细胞质中的遗传物质（如线粒体DNA）来自于受体卵母细胞. 二、生物的性状不仅与遗传物质有关，还受环境的影响。 黑面绵羊去核卵细胞 白面绵羊乳腺细胞核 a 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 b 另一头绵羊的子宫 妊娠、出生 克隆羊多利 1、写出a、b所代表细胞工程名称： 2、实施细胞工程时，所需受体细胞大多采用卵母细胞的原因： 体积大、易操作、营养物质丰富、可为细胞核提供表达全能性的环境。 3、多利面部毛色是： 根据遗传学原理说明判断依据。 4、若黑面绵羊的基因型为AA,白面绵羊的基因型为aa，则克隆羊的基因型为: 细胞核移植 胚胎移植 白色 多利全部的核基因都来自白面绵羊 aa 4.体细胞核移植技术的应用前景（49页） 1、加速家畜遗传改良，促进优良畜群繁育 2、保护濒危物种，增大存活数量 3、转基因动物作为生物反应器，生产医用蛋白 4、作为异种器官移植的供体 5、用于组织、器官的移植 5.体细胞核移植技术存在的问题（50页） 1、成功率低 2、克隆动物存在健康问题 3、克隆动物食品的安全问题 1、定义：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。也称细胞杂交。 一、动物细胞融合 ◆杂交细胞：融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞。 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 诱导融合的因素 生物法：灭活的病毒诱导融合.(因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。) 化学法：聚乙二醇PEG诱导融合. 物理法：电激融合 病毒颗粒黏 附细胞表面 细胞膜连接 细胞膜被 病毒颗粒穿通 细胞融合、形成杂种细胞 不灭活的病毒不能作为诱导剂，因为会感染细胞。 主要用于制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 物理（离心、振动、电激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的过程 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较 (二)动物细胞融合的应用 1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。 2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 3.为制造单克隆抗体开辟了新途径。 鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、 人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡 、人—胡萝卜等 抗体 单克隆抗体 1、传统的抗体制备方法及问题： 反复注射 X 先 把抗原做 成乳剂 小鼠体内有多种B淋巴细胞 可分泌不同抗体 -a -b -c -d -a -b -c -d 不足：产量低、纯度低、特异性差 单克隆抗体的制备—极富创造性的方案 将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合在一起，形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体外快速生长，又能持续分泌成分单一的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原的抗体分子，就是单克隆抗体。 抗原 小鼠脾脏 骨髓瘤 骨髓瘤 未融合的 多种杂交瘤 多种杂交瘤细胞 能产生特定抗体的杂交瘤细胞 提纯单克隆抗体 给小鼠注射特定的 培养 细胞 从 中分离 多种经免疫过的B淋巴细胞（浆细胞） 细胞 灭活的病毒 诱导融合 融合的同种细胞 细胞 细胞 选择 培养基 克隆 检测 小鼠 培养 培养 体内 体外 动物细胞培养. 动物细胞融合 *用到的技术手段： 3）、为何要进行两次筛选？ 第1次筛选得到杂交瘤细胞（多种）。第2次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 问题强化： 1）、本过程利用了哪些技术及原理？ 动物细胞融合（细胞膜的流动性）和动物细胞培养（细胞增殖） 2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌特异性抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体 1、作为诊断试剂：在临床生化诊断、病理组织定位、体内肿瘤的定位等,与常规抗体相比,具有准