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典型的快速叶绿素荧光诱导动力学曲线(O-J-I-P荧光诱导曲线) 叶绿素“荧光感应”的特点 ◇在从暗适应到暴露在光下时,荧光强度先上升,然后下降。 ◇刚暴露在光下时的最低荧光定义为O 点,荧光的最高峰定义为P 点。 ◇快速叶绿素荧光诱导动力学曲线指的就是从O 点到P点的荧光变化过程, (O→I→J→P)。 (二)PEA植物效率分析仪的使用 1、仪器用途 植物效能分析仪(PEA)是一种野外手持式持续激发型的叶绿素荧光分析仪。它提供了标准水平的激发能量和光速探测系统来精确测定荧光感应(Kautsky感应),并自动计算出荧光感应的各种有价值的参数,是研究植物光合作用中光化学过程的重要工具。 2、工作原理: ◇植物所吸收的光能并不能被植物光合作用完全利用,其中一部分能量以荧光的形式释放到环境中去,这就是叶绿素荧光。 ◇当叶子处在黑暗中一段时间后,突然受到光线照射时,叶绿素立即发生荧光感应。荧光感应强度与光合作用效率密切相关。 PEA植物效能仪可以检测到微弱的荧光感应,并且通过微电脑计算出各种生理参数。 ◇PEA植物效能仪具有很高的分辨率,每秒钟能够测定10万次荧光变化,因此是研究光合作用中电子传递瞬间变化的有力工具。 (四)、测定叶绿素荧光诱导动力学曲线的意义 1、在植物生理生态学研究中,测定不同生态环境条件下的叶绿素荧光变化,了解逆境(如干旱、低温、高温、盐害、酸雨等)条件对植物光合作用的影响。 2、在农业科学研究中,通过植物叶绿素荧光测定,可选择植物适宜的生长环境,排除对光合作用产生抑制作用的环境条件。 3、在大气污染及全球变化的研究中,通过对植物叶绿素荧光的测定,可了解大气污染物对叶绿体破坏程度,同时也可了解到对光合作用的影响。 快速叶绿素荧光诱导动力学的应用O,I,J,P诱导曲线的分析 不同年代玉米品种果穗叶ΦPSⅡ在衰老过程中的变化 叶绿素荧光诱导动力学曲线的应用前景 植物本身的生理变化如衰老和缺素、高温、 低温及干旱等逆境胁迫如都能够直接或间接地影响 植物PSⅡ的功能,测定叶绿素荧光诱导动力学曲线 对探讨光合反应系统对环境的适应机制具有重要意义。 【生态学研究仪器设备技术】 * * 【生态学实验】 一、叶绿素荧光分析技术 在植物生理生态研究中的应用 ◇绿色植物健康的叶片经一段时间的暗处理后突然照光,激 发态的叶绿素分子能发出暗红色的荧光,叶绿素的这种光效应称为荧光效应。 ◇叶绿素的荧光是在PSII反应过程释放的,其强度与光照强度成正比,并且随时间不断变化,这种现象称为荧光感应(Kautsky感应)。 ◇荧光随时间变化的曲线称为叶绿素荧光诱导动力学曲线。 (一)、叶绿素的荧光现象 叶片经暗处理后照光时,叶绿素的荧光迅速上升,随后有一系列的慢的波动,逐渐下降到稳态。这现象称为“Kautsky Effect”,是Kautsky等在1931年首先报道的。 荧光产量的变化反映了光化学效率和热耗散能力的变化。 最大荧光 荧光波动 荧光稳态 荧光快速上升过程 o 叶绿素“荧光感应”( Kautsky Effect )现象 最大荧光 荧光波动 荧光稳态 荧光快速上升过程 o O--------P为1秒钟 1 --------100000微秒 1e+1------- 1e+5 微秒 ○“荧光感应”反应了PSⅡ的原初光化学反应及光合反应部位的结构和状态等的变化。 ○下降的阶段反映了光合碳代谢的变化,随着光合碳代谢速率的上升,荧光强度逐渐下降(Krause 和Weis 1991)。 J I 叶绿素荧光诱导动力学曲线 3、主要荧光参数及其意义 Fo ---- 初始荧光产量(Original fluorescence yield ) 也称基础荧光,是PSⅡ反应中心(经过充分 暗适应以后)处于完全开放状态时的初始荧光产量。 Fm ----最大荧光产量(Maximal fluoreseence yield ), 是PSⅡ反应中心完全关闭时的荧光产量。 通常叶片经暗适应20min后测得。 Fv=Fm-Fo ----可变荧光,反映PSⅡ的电子传递最大潜力。 经暗适应后测得。 Fv/Fm ---- PSⅡ量子产量,代表暗适应下PSⅡ反应中心完全开放时的最大 光化学效率,反映PSⅡ反应中心最大光能 转换效率。 Fv/Fo -----光化学活性,代表PSⅡ潜在光化学活性,与有活性的反 应中 心的数量成正比关系。 Ft----------稳态荧光产量 (或Fs ) 。
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