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四、真核生物转录后的加工
生物学网站 生物谷 / 生物秀 / 丁香园论坛 / 中国生物论坛 / Journal of Visualized Experiments 生物网址通 / * * 氨基酸的密码表 (三)tRNA是活化和转运氨基酸的工具 tRNA的二级结构 (四)若干酶类和因子参与蛋白质生物合成 1.氨基酰-tRNA合成酶 氨基酸在组成多肽之前,必须先经过氨基酰-tRNA 合成酶催化并与其特异的tRNA结合。 2.转肽酶(transpeptidase) 使大亚基P位上肽酰-tRNA的肽酰基转移到A位上氨基酰-tRNA的氨基上,结合成肽键,使肽链延长。 3.其他因子 ①蛋白质因子:起始因子﹑延长因子﹑终止因子等; ②无机离子:如镁离子﹑钾离子等; ③供能物质:如ATP﹑GTP等。 ㈠ 氨基酸活化及转运 氨基酸+tRNA+ATP → 氨基酰tRNA +AMP +PPi 氨基酰-tRNA合成酶 二﹑蛋白质合成的一般过程 ㈡ 翻译起始复合物的形成 起始阶段指大亚基、小亚基、mRNA和具有启动作用的起始氨基酰-tRNA聚合为起始复合物的过程。 大肠杆菌细胞翻译起始复合物的形成 大肠埃希菌细胞翻译起始复合物形成的过程: 1.核糖体30S小亚基附着于mRNA起始信号部位 2.30S前起始复合物的形成 3.70S起始复合物的形成 (三)肽链的延长(核蛋白体循环过程) 核蛋白体循环(ribosome circulation) 肽链延长在核蛋白体上连续循环进行,所以这个过程又称核蛋白体循环 每经过一个循环肽链增加一个氨基酸 核蛋白体循环包括进位(register)、成肽(peptide formation)、转位(transposition)三个步骤 (四)肽链合成终 止过程 1.终止密码的辨认 2.肽链和mRNA等释出 3.核糖体大小亚基解聚 肽链合成的终止过程 (五)多核糖体循环 在生物细胞内进行蛋白质合成时,每分子mRNA上同时结合着多个核蛋白体,可以在一条mRNA链上同时合成多条相同的多肽链,大大提高了翻译的效率。 三﹑肽链合成后进行加工和输送 ㈠ 肽链合成后的加工、修饰 1.肽链氨基端的修饰 2.共价修饰 ⑴磷酸化 ⑵糖基化 ⑶羟基化 ⑷二硫键的形成 3.辅助因子的连接和亚基聚合 4.多肽链的水解修饰 蛋白质合成后运送到相应功能部位,称为蛋白质的靶向运输 按功能和去向分成两类: 1.分泌蛋白 由结合于糙面内质网的核蛋白体合成 2.分布于胞质、线粒体及核内蛋白 由游离核蛋白体合 成 ㈡ 蛋白质经过靶向运输到特定区域发挥生 物学活性 靶向输送蛋白 信号序列或成分 分泌蛋白 信号肽 内质网腔蛋白 信号肽,C端-Lys-Asp-Glu-Leu-COO-(KDEL序列) 线粒体蛋白 N端靶向序列(20~35氨基酸残基) 核蛋白 核定位序列(NLS)(-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-,SV40 T抗原) 过氧化酶体蛋白 -Ser-Lys-Leu-(PST序列) 溶酶体蛋白 Man-6-P(甘露糖-6-磷酸) 靶向输送蛋白的信号序列或成分 分泌性蛋白的信号肽形成和靶向运输 第四节 基因表达信息的调控及应用 一﹑基因信息表达受到严密精确的调控 ㈠基因表达调控是发育分化和适应的需要 基因表达(gene expression)是指储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过程。典型的基因表达是基因经过转录、翻译,产生有生物活性的蛋白质的过程。 基因调控分为正调控和负调控。 ㈡基因表达具有时间性和空间性 ㈢基因表达调控是多环节、多步骤的过程 ㈣基因表达包括组成性表达和可诱导/阻 遏表达两种方式 1.组成性表达 (constitutive expression) 指不易受环境变动而变化的一类基因表达,例如管家基因。 2.适应性表达 (adaptive expression) 指环境的变化容易使其表达水平变动的一类基因表达。 二﹑转录水平调控在基因表达中发挥重要 作用 ㈠ 多种要素参与了基因转录调控 1.特异DNA序列 操纵子(operon)由一组结构基因加上其上游的调控区组成。 顺式作用元件(cis-acting element)是指特异性转录因子的结合位点或DNA序列。 2.调节蛋白 3.RNA聚合酶 ㈡ 基因转录调节包括多种常见模式 1
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