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国内外抗-HCV酶联免疫试剂稳定性的比较 作者：杨振，祁自柏，于洋，谷金莲，周诚，张华远，李河民 【摘要】 　　目的 通过对不同生产厂家试剂盒的国家 参考 品检测结果，分析国产丙型肝炎抗体酶联免疫试剂（ELISA试剂）的批内稳定性以及批间稳定性对试剂质量的影响。方法 以国家第三代第二批抗-HCV参考品40份阳性血清，40份阴性血清分别对不同试剂多批次不同批号试剂盒进行检定，利用检测数据进行统计分析，对设定“灰区”血清（CUTOFF×15%）范围内同一试剂不同批次所测得OD值， 计算 其批间CV%值、标准差和标准误。结果 不同国产试剂对Core区、NS3区抗体谱血清漏检情况不同，存在抗体谱漏检错位现象。同一厂家不同批次检测弱阳性临界值血清CV%值较高，“灰区”标本血清检测结果变化较大。结论 建议试剂生产厂家应建立临界值对照血清，以控制“灰区”标本的检测结果，确保试剂的批间稳定性。 【关键词】 肝炎；病毒；酶联免疫；试剂；稳定性 ［Abstract］ Objective To investigate the quality of domestic anti-HCV EiA kits and analyse thEIr different batchs stability. Methods Forty positive sera and 40 negative sera were detected by 17 domestic anti-HCV EIA and 3 imported anti-HCV EIA kits.The suspicious samples were confirmed with RIBA and PCR，and we calculated CV%，Stdeva and Steyx of five batchs kits of five domestic and one imported manufactures detecting grey zone panel in succession. Results Almost the whole domestic manufactures had false positive and negative report.These results were distinct.The results of domestic EIA Kits CV%，Stdeva and Steyx were comparely higher than import’s. Conclusion We suggest that the domestic manufactures must establish the system of critical serum control. ［Key words］ hepatitis;virus;veagent;stability 中国 药品生物制品检定所从1994年开始建立国家参考品，经多年努力，国产试剂质量有了很大提高。但在实际应用中，仍存在试剂检测结果不稳定等问题，下面笔者利用第三代第二批抗-HCV诊断试剂国家参考品检验了17个国内生产厂家和三个国外生产厂家的试剂，并对检验结果进行初步分析。 1 材料与方法 1.1 试剂 （1）参加国家抗-HCV诊断试剂批批检定的国产抗-HCV诊断试剂17家95批。（2）参加国家抗-HCV诊断试剂常规进口检定的国外抗-HCV诊断试剂3家9批。（3）抗-HCV确证试剂为美国CHIRON公司免疫印迹确证试剂（RIBA，CHIRON RIBA 3.0）。（4）HCV RNA PCR试剂为河南华美公司、北京肝炎试剂中心、深圳匹基公司等单位提供。 1.2 血清 国家第三代第二批抗-HCV参考品，包括40份特异性阴性血清，40份阳性血清。合格标准为40份特异性阴性血清合格率≥39/40，40份阳性血清符合率为≥38/40，总符合率为≥77/80。 1.3 方法 对抗-HCV EIA国产和进口试剂均严格按其使用说明书进行操作，以国家第三代第二批抗-HCV参考品中的80份血清作为待检样品进行检测，血清检测结果按各试剂使用说明书的判定方法判定。 1.4 仪器 美国BIO-RAD酶标仪，国产1575洗板机。 2 结果 2.1 检测OD值结果 从17个国内厂家与三家国外厂家分别选一批试剂，对国家参考品中易漏检样品检测OD值进行比较，见表1。国产14、15、17号厂家试剂的检出率较高，同时它们试剂的检测临界值也比较高。这些国产试剂和进口主流试剂的差距不大，它们代表我国试剂的 发展 方向，同时确保了国产试剂在筛检献血员的高质量使用。但部分国产试剂对代表Core区的P2号血清和代表