胃癌组织 PTEN基因的表达及其与MMP9的相关性.docVIP

胃癌组织 PTEN基因的表达及其与MMP9的相关性 作者：覃月秋 黄赞松 何守搞 周喜汉 【摘要】 　　目的 检测抑癌基因PTEN在胃癌中的表达，观察其与胃癌临床病理因素的关系及与MMP9蛋白表达的相关性。方法 应用免疫组化法检测57例胃癌及其癌旁正常组织PTEN基因和MMP9蛋白的表达。结果 胃癌组织PTEN蛋白表达的阳性率（61.4%）明显低于相应正常组织（100%）（P0.01），其表达水平与组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（P0.01）。 胃癌组织MMP9蛋白表达的阳性率（73.7%）明显高于相应正常组织（19.3%）（P0.01），其表达水平随胃癌浸润深度增加、淋巴结转移及TNM分期的进展而增高。PTEN蛋白表达强度与MMP9蛋白表达强度之间呈明显负相关（rs=-0.462，P0.01）。 结论 提示抑癌基因PTEN的表达与胃癌生物学行为密切相关；在胃癌发生、 发展 过程中，可能由于PTEN蛋白的低表达或失表达，不能有效抑制MMP9的异常激活，促进了癌细胞的浸润、转移。 【关键词】 胃肿瘤；抑癌基因；PTEN；MMP9；浸润和转移 　　与细胞支架蛋白tensin同源在10号染色体有缺失的磷酸酯酶（PTEN）是近年发现的第1个具有磷酸酶活性的抑癌基因〔1〕。它能通过对酪氨酸、丝氨酸/苏氨酸脱磷酸化作用调控细胞内多种信号传导通路，从而调节细胞的生长、发育，诱导细胞凋亡，调控细胞周期以及抑制肿瘤细胞黏附、转移。研究发现，PTEN基因突变、缺失及异常表达与人类多种恶性肿瘤的发生、发展及预后密切相关〔1～3〕。基质金属蛋白酶9（MMP9）能降解基膜和细胞外基质中的型胶原成分，为恶性肿瘤的浸润、转移及肿瘤间质血管的新生提供有利条件〔4〕。关于PTEN基因对转移相关酶MMP9的调节机制国外已有少量 文献 报道。本研究通过检测抑癌基因PTEN在胃癌中的表达，观察其与胃癌临床病理因素的关系及与MMP9蛋白表达的相关性，探讨PTEN基因在胃癌发生、发展过程中的作用。 　 　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　57例原发性胃癌及癌旁正常组织取自本院1999至2002年经病理证实的手术切除标本蜡块或活检组织，患者术前均未经放疗和化疗。57例癌组织中，男性39例，女性18例，年龄30～75岁,平均(49±5.35岁)。按分化程度：低分化癌39例，高分化、中分化癌18例。癌转移情况：有淋巴结转移32例，无淋巴结转移25例；远处转移7例，无远处转移50例。胃癌浸润深度：浸润未超过浆膜层（T1+T2）22例，浸润超过浆膜层（T3+T4）35例。TNM分期：期13例，期11例，期24例，期9例。 　　1.2 方法 　　每例取原发灶癌组织、切缘正常组织及转移淋巴结，组织经10%甲醛固定，石蜡包埋，4 μm连续切片，分别进行HE染色和免疫组化SP法染色（操作按试剂盒说明书进行）。鼠抗人PTEN单克隆抗体及鼠抗人MMP9单克隆抗体均为Santa Cruz 公司产品。SP试剂盒购自福州迈新生物公司。以PBS代替一抗作阴性对照。 　　1.3 结果判断 　　PTEN和MMP9蛋白染色阳性反应信号呈棕黄色细小颗粒，定位于胞浆。在高倍镜（×400）下每张切片至少 5个随机视野中计数500个细胞， 计算 阳性细胞数的百分比。按切片中阳性细胞率及染色反应强度分为4级：阴性（-）：细胞内不着色或阳性细胞率10%；弱阳性（+）：细胞内出现浅棕色颗粒和（或）阳性细胞率为10%～29%；阳性（）：细胞内出现棕黄色颗粒和（或）阳性细胞率为30%～60%；强阳性（）：细胞内出现深棕黄色颗粒和（或）阳性细胞率60%。 　　1.4 统计学处理 　　采用SPSS10.0统计软件对数据进行χ2检验及Spearman等级相关分析。 　 　2 结 果 　　2.1 胃癌组织及癌旁正常组织中PTEN蛋白和MMP9蛋白的表达 　　PTEN蛋白染色阳性反应信号呈棕黄色细小颗粒，位于细胞质。胃癌组织中PTEN蛋白表达的阳性率61.4%（35/57）显著低于癌旁正常胃黏膜 100%（57/57）（P0.01）。MMP9蛋白染色阳性反应信号呈棕黄色细小颗粒，位于细胞浆。癌组织MMP9蛋白表达的阳性率73.7%（42/57）明显高于相应正常组织19.3%（11/57）（P0.01）。 　　2.2 胃癌中PTEN和MMP9蛋白表达的相关性 　　胃癌中PTEN蛋白的表达强度与MMP9蛋白的表达强度呈负相关（rs=-0.462，P0.01），随着PTEN蛋白表达强度的增加，MMP9蛋白表达强度减弱，反之亦然。见表1。表1 胃癌组织PTEN和MMP9蛋白表达的相关性 （略） 　　2.3 胃癌组织PTEN蛋白和MMP9蛋白表达与临床病理特征的关系 　　TNM分期、期胃癌组织PTE