叶片接种方式和暗培养时间对青砧1号不定芽再生的影响.pdfVIP

落叶果树2017，49(2)：08—10 Decid∞淞Frui拈 ·试验研究· 叶片接种方式和暗培养时间 对青砧1号不定芽再生的影响 葛红娟1’2，兰岚3，马荣群1，沙广利1，郝玉金2+ (1．青岛市农业科学研究院，山东青岛266000；2．山东农业大学；3．青岛市农业广播电视学校) 摘要：以青砧1号组培苗为试材，探讨叶片的接种方式和暗培养时间对叶片不定芽再生的影响。结果 表明，以叶背面接触培养基且暗培养3天的叶片不定芽再生数最多，叶片最优。 关键词：青砧1号；叶片接种方式；暗培养；不定芽再生 中图分类号：5661．1文献标识码：A 文章编号：1002—2910(2017)02—0008—03 苹果(Malus pumila)矮化密植是现代苹果生产 1试验材料与方法 发展的趋势…。选用适宜的矮化砧木是实现矮化密 植的主要途径之一。国内应用的矮化砧木有 1．1试验材料 GM256、SH6、M9、M26等，多用作于中间砧心J，这与国 2015年4月中旬，于晴朗天气剪取青岛市农业 外主要推广的自根砧方式旧1相比存在成活率低、个 科学研究院北宅基地向阳、健壮、无病害的青砧1号 体差异大、整齐度偏低等问题。 植株的新梢，立即置于冰盒带回实验室，进行表面清 青砧1号是从平邑甜茶与柱形苹果株系杂交后 洗，酒精和升汞复合消毒，无菌水清洗3次。将消毒 0．5 代中选育成的无融合生殖苹果砧木，具有结果早、抗 新梢茎尖置于初代培养基MS+6一BA mg／L+ NAA0．01 逆性强，与多个主栽品种的嫁接亲和能力强H’51等优 mg／L上培养。选择初代培养的无污染、生 点，能通过种子繁殖，根系发达，整齐度达85％以上，长状态旺盛的植株继续扩繁，继代培养基与初代培养 是适宜推广的良好的苹果砧木。 基配方一致。每20天继代1次，多次继代后，获得足 青砧l号也存在一些不足，如易发白粉病等。采 够的试验植株。 用转基因技术是现阶段改良性状的主要途径之一。 1．2试验方法 周瑞金等M1通过微嫁接技术，验证了苹果外源nptⅡ 取生长一致的青砧1号组培苗茎尖，统一转接至 基因只在转化植株体内表达，不通过嫁接在接穗和砧 同一批次继代培养基中。20天后，取完全展开、颜色 木间进行传导。李永红¨1成功转化苹果砧木M26，深绿的叶片，沿主脉垂直方向划伤叶片准备接种(划 并提高其抗盐性。李海云【8o优化了GM256和M9的3道，不断开)。接种方式设置为叶片正面接触培养 遗传转化体系。吴瑞刚等旧1建立了青砧1号的高效基和叶片背面接触培养基，每培养基各4片，分两行 离体再生体系，但就叶片的接种方式和光照条件的优 整齐排列于同一瓶中；暗培养时间设为0天、3天、7 化未见讨论。笔者参考吴瑞刚等一1报道的最优再生 天、14天，每个时间点处理3瓶，取出后置于16小时 培养基配方，研究青砧1号组培苗叶片的不同接种方 光照、8小时暗培养周期下培养，20天后观察叶片不 式和暗培养时间对叶片不定芽再生的影响，进一步优 定芽的再生情况，统计再生不定芽数和生长情况。 化高效再生体系，为转基因技术的应用打好前期基础。 收稿日期：2016—06—28 基金项目：山东省现代农业产业技术体系创新团队岗位专家项目(SDArr一06—03) +通讯作者：郝玉金(1971一)，男，山东章丘人，教授，从事果树分子生物学与生物技术研究。 作者简介：葛红娟(1985一)，女，山东聊城人，助理研究员，果树资源育种及分子生物学研究。E—mail：蝌2@163．corn 一8一 万方数据 第2期