生物：11《工具酶的发现和基因工程的诞生》课件浙科版选修3.pptVIP

第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生 基因工程的诞生 时间：20世纪70年代 理论基础： DNA双螺旋结构 遗传信息传递方式（中心法则） 技术基础： 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 运载体 1、限制性内切酶 （3）.举例：大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 （5）作用结果：形成DNA片段末端 ①平末端：平切（相同部位） ②黏性末端：错位切（不同部位） （2）常用种类： ①E.coli DNA连接酶： “分子运输车” ——运载体 1.作用： 2.种类：质粒、噬菌体和动植物病毒 质粒的特点: 1、细胞染色体（或拟核DNA分子）外能自主复制的小型环状DNA分子； 2、质粒的存在对宿主细胞无影响； 3、质粒的复制只能在宿主细胞内完成。 问题: 1.什么是限制性内切酶?作用是什么? 2.限制性内切酶如何识别,切割DNA分子? 3.它的发现,对于基因工种诞生有何意义? 4.DNA连接酶是什么?作用是什么? 5. 它的发现,对于基因工种诞生有何意义? 6.质粒是什么?为什么能作为转基因的载体? 7.具备什么条件的物质可以作为基因的载体? 8.还有什么物质可以作为基因的载体? 9.质粒作为载体的发现,对基因工程的意义? * 1、什么叫基因？ 思 考： 3、什么是遗传信息？如何表达？ 2、基因、DNA、染色体之间是怎样的关系？ 什么叫基因工程？ 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 （一）基因工程的概念 实质 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 实质 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 DNA重组技术的基本工具 准确切割DNA的工具（“分子手术刀”） DNA片段的连接工具（“分子缝合针”） 基因转移工具（“分子运输车”） 　　基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具： 基因工程的基本内容 基因操作 基本步骤 基因操作 的工具 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 运载体 2.目的基因与运载体结合 4.目的基因的检测和表达 3.将目的基因导入受体细胞 1.提取目的基因 一　基因操作的工具 　　基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具： １、基因的剪刀──限制性内切酶（限制酶） 　　一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。 指一类酶，非一种酶。 （1）作用部位：磷酸二酯键 （2）特点：专一性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。 （4）来源：主要从原核生物中分离 原因：限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶，能将外来的DNA切断，对自己DNA无害，保护细胞原有遗传信息，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。 而真核生物一般有其他保护措施。 　　DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制酶切断的几个DNA具有相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就可以合成重组的DNA分子了。 ２、基因的针线──DNA连接酶 （1）连接的部位：DNA双链片段间的 磷酸二酯键，不是氢键。 来源：大肠杆菌 作用：连接黏性末端 ②T4 DNA连接酶： 来源：T4噬菌体 作用：连接黏性末端、 平末端 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T