第三章 电泳技术-张静课件.pptVIP

第三章 电泳技术 电泳技术的基本知识 一、定义 电泳—带电粒子在直流电场中向着电性相反的电极方向移动的现象。 电泳技术—利用电泳现象进行物质分离的技术。 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳示意图(A为正面,B为剖面) 醋酸纤维素薄膜电泳装置 醋酸纤维素薄膜电泳的应用： 医学上，常用于分析血清蛋白、胎盘球蛋白，其优点是简便迅速，便于保存照相，比纸电泳分辨率高。 第五节 凝胶电泳 凝胶电泳主要分为： 聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳， 琼脂糖凝胶电泳主要应用于核酸的分离纯化， 聚丙烯酰胺凝胶电泳主要用于蛋白质和小分子核酸、 1、机械强度高，透明 2、原料成分纯度高，制凝胶的重复性好 3、凝胶孔径可调 4、化学稳定性和热稳定性好 5、电渗作用小 6、电泳分辨率高 1、pH梯度形成的机制 载体两性电解质既有酸性基团(—NH2＋－)，也有碱性基团(—COO－)，既可接受质子，也可释放质子。 在制备聚丙烯酰胺凝胶时，将其混溶其中。电泳时凝胶板正极的电极液是磷酸，负极是氢氧化钠。 ◆◆正极是酸性环境，载体两性电解质都带正电荷，但由于pI的不同，其所带正电荷数量就有所差异，电泳时，向负极泳动的速度也就因此不同。 2、两性电解质载体 两性电解质载体是用多烯多胺和不饱和酸合成的脂肪族多氨基多羧基化合