第三章 灭菌和除菌工艺和设备.pptx

第三章 灭菌与除菌工艺及设备;在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的后果： 生产菌和杂菌同时生长，生产菌丧失生产能力； 在连续发酵过程中，杂菌的生长速度有时会比生产菌生长得更快，结果使发酵罐中以杂菌为主； 杂菌及其产生的物质，使提取精制困难； 杂菌会降解目的产物； 杂菌会污染最终产品； 发酵时如污染噬菌体，可使生产菌发生溶菌现象。;第一节 发酵生产在有害微生物的控制;二、控制有害微生物的主要方法 ;灭菌方法;（一）热灭菌的原理 ; 杀死微生物的极限温度称为致死温度 (lethal temperature)。在致死温度下，杀死全部微生物所需的时间称为致死时间；在致死温度以上，温度愈高，致死时间愈短。 ;各种微生物对湿热的相对热阻;1. 对数残留定律实验证明，微生物营养细胞的均相热死灭动力学符合化学反应的一级反应动力学，即：;;在一定温度下，比死亡速率k随微生物种类不同而不同。 营养细胞VS芽孢(spore, endospore ) 同一种微生物来说，比死亡速率k值随着温度的变化而变化。;同一种微生物来说，比死亡速率k值随着温度的变化而变化。 即一级反应;（5）;k是ΔE和T的函数，k对T的变化率与有关，对（5）两边对T的导数，得（6）;;大部分培养基的破坏可认为是一级反应;培养基温度;培养基成分的破坏;受热物质;嗜热脂肪芽孢杆菌孢子和维生素B12的lnk-1/T图;嗜热脂肪芽孢杆菌孢子死灭程度为N/N0=10-16时，灭菌温度对维生素B12破坏的影响;;在发酵罐中进行实罐灭菌，是典型的分批灭菌。全过程包括升温、保温、降温三个过程;1)升温阶段;1)升温阶段;死亡比速为常数;总灭菌时间：;1)升温阶段;计算举例参见： 《微生物工程工艺原理》姚汝华 《生化工程》伦世仪主编;三、连续灭菌(continuous sterilization);发酵罐;3、连续灭菌设备的结构;板式换热器结构 (plate exchanger);;喷淋冷却;连续灭菌与分批灭菌的比较与选择;选择原则：;发酵罐空消之后不能立即冷却，先用无菌空气保压，待灭菌的培养基输入罐内后，才可以开冷却系统进行冷却。 分空气过滤器在发酵罐灭菌之前进行灭菌，灭菌后用空气吹干备用。 补料罐的灭菌温度视物料性质而定，如糖水，灭菌时蒸汽压力为0.1MPa(121℃)，保温30分钟。油罐(消沫剂罐)灭菌时，其蒸汽压力为0.15-0.18MPa，保温60分钟。 补料管路、消沫剂管路可与补料罐、消沫剂罐同时举行灭菌，保温时间为1小时。 移种管路灭菌一般要求蒸汽压力为0.3～0.45MPa，保温1小时。 ;补料液的灭菌;第三节 空气灭菌制备;空气中的微生物种类以细菌和细菌芽胞较多，也有酵母，霉菌和病毒。 微生物大小不一，一般附着在空气中的灰尘上或雾滴上。 ;空气中微生物的分布 ;空气除菌的方法和要求 ;发酵用空气质量标准 ;一、空气除菌的方法与原理;1、原理 α射线、X射线、β射线、γ射线、紫外线、超声波等从理论上讲都能破坏蛋白质，破坏生物活性物质，从而起到杀菌作用。 2、应用范围 通常用于无菌室和医院手术室。 3、缺点 杀菌效率较低，杀菌时间较长。一般要结合甲醛蒸汽等来保证无菌室的无菌程度。;利用压缩热进行空气灭菌的流程图;（三）静电除菌Electrostatic sterilization 1、原理：利用静电引力来吸附带电粒子而达到除尘、除菌的目的。 2、优点 阻力小，约1.013×104Pa 除水、除油的效果好 耗电少 3、缺点 设备庞大 、一次性投资较大 、捕集率尚嫌不够，需要采取其它措施。 ;（四） 过滤除菌(Filter degerming);;小颗粒的相对尺寸;过 滤 机 理;;;2）惯性撞击 空气气流流速大时，气流中的微粒具有较大的惯性力。当微粒随气流以一定速度向纤维垂直运动因受纤维阻挡而急剧改变运动方向时，由于微粒具有的惯性作用使它们仍然沿原来方向前进碰撞到纤维表面，产生摩擦粘附而使微粒被截留在纤维表面，这种作用亦称惯性碰撞截留。;惯性撞击; 截留区域的大小决定于微粒运动的惯性力，所以，气流速度愈大，惯性力大，截留效果也愈好。此外，惯性碰撞截面作用也与纤维直径有关，纤维愈细，捕集效果愈好。惯性碰撞截面在介质除尘中起主要作用。 对大于 0.5 - 1.0 微米的颗粒很有效。 ;3）扩散拦截;扩散拦截;4）重力沉降作用;5）静电吸附作用;小结;过滤机理总结;二、无菌空气的制备流程;（一）空气的预处理;（二）空气过滤;2、冷热空气直接混合式除菌流程;3、热空气加热冷空气流程;;三、空气预处理设备;（一）粗过滤器;2、油浴洗涤装置;（二）空压机(通风设备);（三）空气储罐;（四）气液分