南华大学生物化学第11章转录.pptVIP

TATA盒（启动子核心序列） CAAT盒（启动子上游元件） GC盒（启动子上游元件） 增强子 顺式作用元件 结构基因 -GCGC---CAAT---TATA 转录起始点 真核生物启动子保守序列 启动子 （一）转录起始前的上游区段 具有启动子核心序列 能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，现已发现数百种，统称为反式作用因子(trans-acting factors)。 反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，则称为转录因子(transcriptional factors, TF)。 （二）转录因子 参与RNA-pol Ⅱ转录的TFⅡ 真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子。 （二）转录起始前复合物 POL-Ⅱ TFⅡF ⅡA ⅡB 由RNA-Pol Ⅱ催化转录的转录起始前复合物 POL-Ⅱ TFⅡF ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA ⅡA ⅡB TBP TAF TATA ⅡH ⅡE CTD- P PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化 三、真核生物转录延长过程中没有转录与翻译同步现象 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。 RNA-pol前移处处都遇上核小体。 转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。 RNA-Pol RNA-Pol RNA-Pol 核小体 转录延长中的核小体移位 转录方向 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA （三）转录终止 —— 和转录后修饰密切相关。 四、真核生物的转录终止和加尾修饰同时进行 第四节 真核生物RNA的加工 一、真核生物mRNA的加工包括首、尾修饰和剪接 真核生物mRNA转录后，需进行 5?-末端、 3?-末端的修饰，及mRNA的剪接。 核内的初合成的mRNA称为非均一RNA (hetero-nuclear RNA, hnRNA)，不表现活性。 加帽需两种酶：加帽酶和甲基转移酶 （一）前体mRNA在5?-末端加入帽子结构 帽子结构(m7GpppGp —) （三）前体mRNA在3’端特异位点断裂并加上多聚腺苷酸尾 结构基因的3’末端是没有多聚合T的，因此mRNA的polyA尾是在转录后加工过程中加上去的，为加尾酶催化完成。 转录不是在polyA的位置上终止，而是超出数百个乃至上千个核苷酸后才停顿。 读码框下游有一组共同序列，为加尾信号：AAUAAA。 polyA尾的长度一般为100~200个核苷酸左右。同时少数几个基因的转录产物mRNA是没有polyA尾的，如组蛋白基因。 意义： poly(A)尾可以结合一种或多种特殊蛋白质，保证mRNA在核内不被降解。并在翻译过程中有重要作用。 真核生物mRNA加polyA尾 （三） 前体mRNA的剪接主要是去除内含子 1. hnRNA 和 snRNA 核内的初级mRNA称为杂化核RNA (hetero-nuclear RNA, hnRNA) 断裂基因: 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 2. 外显子(exon)和内含子(intron) 外显子：在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。 内含子：隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 C A B D 编码区 A、B、C、D （外显子） 非编码区(内含子) snRNA (small nuclear RNA)，为核小RNA，分子中富含U，以U作分类命名。现已发现有snRNA U1、U2、U4、U5、U6等5 种，分子中富含U。 核内蛋白质 （50多种） 小分子核糖核蛋白体snRNP（剪接场所） snRNA 剪接体 hnRNA 去除初级转录产物上的内含子，把外显子连接为成熟的RNA，称为剪接。 3. mRNA的剪接（mRNA splicing） 大多数内含子都以GU为5’端的起始，而其3’末端则为AG-OH-3’。 5’ GU------ AG-OH-3’称为剪接接口，或边界序列。 mRNA的剪接步骤 snRNP与hnRNA结合成为并接体 ① 内含子5’-端和3’-端的边界序列分别与U1、U2的snRNA配对，snRNP结合在内含子的两端。 ② U4、U5、U6加入，形成完整的剪接体。内含子弯曲形成套索。 ③结构调整，释放U1、U4、U5。