复制、转录、翻译2010-5-21.pptVIP

染色体 细菌、质粒、某些病毒、叶绿体、线粒体 第一部分 DNA复制 三、引物 DNA聚合酶催化合成DNA链时需要引物提供自由的3′-OH 主要为RNA，少量DNA病毒以DNA或核苷酸为引物 大肠杆菌DNA的复制过程 DNA 连接酶 真核生物的DNA聚合酶 第二部分 转录调控 顺反子：编码一条多肽链的遗传单位。 真核生物：单顺反子 原核生物：多顺反子 1、RNA聚合酶 启动子 大肠杆菌的两类终止子 （1）内源性终止子（intrinsic terminator） 一、原核基因转录调节 （一）乳糖操纵子调节机制 1、乳糖操纵子的结构 （二）阻遏蛋白的负性调节 没有乳糖存在时 有乳糖存在时 （三）CAP的正性调节 （四）协调调节 色氨酸操纵子 衰减子（attenuator）： 　　操纵子前导区内类似于终止子结构 的一段DNA序列，称为衰减子。其作用 是减弱操纵子的转录。 DNA损伤、修复 一、 DNA损伤 DNA损伤即是指在生物体生命过程中DNA双螺旋结构发生的任何改变。 DNA损伤大体上可以分为两类：单个碱基改变和结构扭曲。 （一）、自发性损伤 1. 复制中的损伤 指复制过程中碱基配对时发生的误差再经过DNA聚合酶“校读”和单链结合蛋白等综合因素作用下仍然存在的DNA损伤。 2. 碱基的自发性化学改变 这类损伤包括互变异构、碱基的脱氨基作用、自发的脱嘌呤和脱嘧啶、以及细胞代谢产物对DNA的损伤。 二、物理因素引起的损伤 1. 紫外线引起的DNA损伤 紫外线（UV）照射引起的DNA损伤主要是形成嘧啶二聚体。 2. 电离辐射引起的DNA损伤 三、化学因素引起的DNA损伤 1.烷化剂对DNA的损伤 DNA链上的磷酸二酯键被烷化则形成不稳定的磷酸三酯键，可能在糖与磷酸间发生水解作用，导致DNA链的断裂。 2. 碱基类似物对DNA的损伤 碱基类似物是一类结构与碱基相似的人工合成的化合物。最常见的碱基类似物是5-溴尿嘧啶（5-BU）。 （二） DNA修复 一、切除修复 1.碱基切除修复（base excise repair，BER） DNA糖苷酶：能特异识别DNA中发生改变的碱基，并将其切除 2. 核苷酸切除修复（nucleotide excise repair, NER） 可以修复几乎所有类型的大型损伤，例如：UV照射形成的嘧啶二聚体以及致癌剂引起的大面积烷基化。 巨大的多酶复合物，识别特殊碱基改变 二、直接（回复）修复 直接修复即简单地把损伤的碱基回复到原来状态的修复，可分为以下几种： 1. O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶直接修复 通过从O6-甲基鸟嘌呤上把甲基直接转移到酶的半胱氨酸残基上来直接回复DNA的损伤。 2. 光解酶复活 酶学光复活过程是修复UV导致的环丁烷嘧啶二聚体的直接机制，这种修复具有高度的专一性。 3. 单链断裂修复 DNA单链断裂是损伤的一种常见形式，可以通过DNA连接酶的重接而修复。 P P P P P P P P P P P P P P P P P P P P P P T T T T T T A A A A A A G G G G G C C C C C HO OH OH P P DNA-pol ? 复制中延长随从链（滞后链） DNA-pol ? 没有其他pol时才起作用 DNA-pol ? 催化线粒体DNA的复制 DNA-pol ? 复制中延长领头链 DNA-pol ? 校读、修复和填补缺口 -10区：TATA区（又称Pribnow box) T89A89T50A65A65T100 -35区：TTGACA区 T82T84G78A65C54A45 内源性终止子的基本结构 1) 二级结构中的发夹(长度7-20 bp; 发夹靠近基部通常有一个G-C富集区）。 2) 转录单位最末端的连续约6个U残基组成的片段。 内源性终止子作用机理 （2）ρ-依赖型终止子 乳糖通透酶 一、顺式作用元件和反式作用因子 Cis-acting element：不编码任何产物的DNA片段，能影响与之相联系的同一条DNA链上的基因表达 :启动子。 Trans-acting factor （转录因子TF）