生物化学第十六章RNA的生物合成.pptVIP

二、tRNA的转录后加工 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA 目 录 RNAaseP、内切酶 目 录 tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP 目 录 碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 目 录 三、rRNA的转录后加工 转录 45S - rRNA 剪接 18S - rRNA 5.8S和28S-rRNA rDNA 内含子 内含子 28S 5.8S 18S 核酶研究的意义: 核酶的发现，对中心法则作了重要补充； 核酶的发现是对传统酶学的挑战； 利用核酶的结构设计合成人工核酶 。 四、核 酶 (ribozyme ) 核酶: 具有酶活性的RNA称为核酶。 思考题 1、RMA合成酶的组成 ２、模板的方向和合成的方向 3、比较RMA合成和DMA合成的同异（原料、模板、酶类、 合成过程） 4、mRMA和tRMA合成后加工的特点 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 在同一DNA模板上，有多个转录同时在进行； 转录尚未完成，翻译已在进行。 这种形状说明： 依赖ρ ( Rho )因子的转录终止 （三）转录终止 RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 分类 非依赖ρ因子的转录终止 (1)ρ因子是由相同亚基组成的六聚体蛋白 质。 (2)ρ因子对RNA产物 3? 的poly C结合力很强。 (3)ρ因子有ATP酶和解螺旋酶的活性,解螺旋酶使DNA/RNA杂化双链拆离。 1、依赖ρ因子的转录终止 ρ因子的作用原理： 功能： ρ和RNA结合使RNA聚合酶变构，从而使RNA聚合酶停顿。 解螺旋酶的活性使DNA/RNA杂化双链拆离。 2. 非依赖ρ 因子的转录终止 RNA产物靠近终止处的3?有些特殊的碱基序列（ poly u），在靠近它的5?上游区形成特殊的发夹结构来终止转录。 RNA 3?TTGCAGCCTGACAGATCAGGCTGATGGCTCCTCTGTTTTTAGGCACCAGCCTTTTT... 5? DNA UUUU..… 5`UUCGUCGGACUGUCUAGUCCGAGUACGAGGAGACUUUUUUCCGUGGUCGGUUUUU... 3` 茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构 5` 3` 茎环结构使转录终止的机理 使RNA聚合酶变构，转录停顿； 使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。 5′pppG 5? 3? 3?5? RNA-pol RNA合成过程 起始 双链DNA局部解开 磷酸二酯键形成 终止阶段 解链区到达基因终点 延长阶段 5? 3? ? ? RNA 启动子（promoter) 终止子(terminator) 5? ? RNA聚合酶 ? 5? ? 3? 5? ? 3? 5? 5? 3? ? 离开 ATPN GTPN UTPN CTPN RNA AMPN GMPN UMPN CMPN RNA聚合酶 DNA模板 RNA的生物合成总反应: Mg2+或Mn2+ + N ppi DNA模板的方向： 3′ 5′ RNA合成的方向： 5′ 3′ 原 料 RNA分子中 一、真核生物的RNA聚合酶 (mRNA) 分 布 核 仁 核 质 核 质 第三节 真核生物的转录 真核生物RNA聚合酶的结构比原核生物复杂，所有真核生物的RNA聚合酶都有两个不同的大亚基和十几个小亚基. RNA聚合酶Ⅱ由12个亚基组成，其最大的亚基称为RBP1。 RNA聚合酶Ⅱ最大亚基的羧基末端有一段共有序列为酪-丝-脯-苏-丝-脯-丝的重复序列片段，称为羧基末端结构域( CTD)。CTD对于维持细胞的活性是必需的。 二、转录起始 真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化，转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂---拼板理论。 转录起始点 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 顺式作用元件(cis-acting element) 1. 转录起始前的上游区段 AATAAA 切离加尾 转录终止点 修饰点 外显子 翻译起始点 内含子 OCT-1 OCT-1：ATTTGCAT八聚体 2. 转录因子 能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，现已发现数百种，统称为反式作用因子。 反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，称为转录因子(TF)