分子生物学8第八章基因表达调控.ppt

第一节 基因表达调控的概述 Prok.和Euk.的调控极其相似 糖皮质激素受体 ZYJ272 第二节 乳糖操纵元 4、阻遏蛋白与操作子的相互作用 三、 Lac Operon的正调控－－CAP-cAMP复合物 一、结构 二、阻遏调控机制 1、Trp Operon mRNA的前导序列结构 2、前导序列的二级结构 决定RNApol在弱化子处是终止转录还是继续转录 ★ 序列2和3配对时，RNApol继 续转录，使前导序列后的结构 基因得以转录 第四节 基因转录的时序调控 ? Prok.中研究最多的是鼠伤寒沙门氏菌的鞭毛基因的相变 过程 一、沙门氏菌的Ⅰ、Ⅱ相及基因分布 第七节 Euk.基因表达调控 b) 特异基因表达 ? 细胞分化 如果 1000/10000(10%) 基因表达 （9000基因关闭） Negative control; 9000 repressor required Positive control; 停止合成 9000 特异tran-factor 即只合成1000特异expresser 经济 合理 有效 二、Euk.DNA水平的调控 1、 基因拷贝数的改变 a) 基因的丢失 （DNA fragment or chromosome lose） 蛔虫胚胎发育过程中有27%DNA的丢失 细胞分化过程中，可以通过丢失掉某些基因而去除 这些基因的活性 某些低等Euk.：原生动物、线虫、昆虫和甲壳类动物 体细胞内丢失整条或部分染色体 将来分化产生生殖细胞的细胞内不发生基因的丢失 高等Euk.内尚未发现 b) 基因的扩增 (特定基因在特定阶段的选择性扩增) 在没有发生细胞分裂情况下，细胞内某些特定基因的 拷贝数专一性大量增加的现象 ? 细胞短期内为满足某种需要而产生足够的基因产物的 一种调控手段 ? 两栖类和昆虫卵母细胞rDNA的扩增 例：非洲爪蟾 体细胞rDNA约 500copies 卵母细胞 200万copies（4000倍） ? chromatin 状况与基因表达相关 证据1： 转录活化区/ 非转录活化区染色质的结构差异 活跃转录区对 Dnase敏感 核小体结构不完整 没有连接的H1 常染色质 gene on 异染色质 gene off 2、 转录区染色质结构的变化对基因表达的控制 量大， 进化保守， 与DNA 无专一性结合区 H2A, H2B, H3, H4 modified by 乙酰化、磷酸化 表达非常活跃的rDNA 转录区无nucleosome 结构 凡被Trans-factor 结合的区域 均能阻止nucleosome 形成 降低组蛋白的正电荷 组蛋白解聚 核小体松弛 活跃转录区的组蛋白确实被乙酰化、磷酸化 证据2； 体外重建染色质改变转录效率 Naked DNA DNA + H2A, H2B, H3, H4 转录速度 ＞ 转录速度 转录速度 ＞＞ 转录速度 complete nucleosome add H1 3、 m5C对基因表达的调控 a) m5C是真核生物 DNA中的主要修饰成分 多发生在CpG序列中, 不同细胞间m5C 相差甚大 b) m5C对基因转录抑制的表现 m5C 在大沟内影响DNA与T.F.间氢键的形成 大沟内m5C 导致空间的拥挤,破坏构象的平衡 使B-DNA ? Z-DNA ? T.F.结合空间的改变 降低转录因子与DNA的结合 4、Euk.的基因重排 啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）接合型的决定 接合型 MATa MATα 单倍体细胞或a或α 接合型互变需要HO基因 －－编码内切酶 1、单倍体接合型受 MATa MATα控制 同宗不能接合，异宗能 接合 α a a α α a 2、接合型互变的匣子模型 a、单倍体细胞中同时存在 MATa和MATα的遗传信息 b、活跃匣子MATa或MATα 沉寂匣子HMLα、HMRa 在同一条染色体