分子生物学精减5转录-13硕.ppt

●基本概念 ● 参与转录的关键酶与重要元件： 启动子 RNA聚合酶　 转录起始复合物 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 一、基本概念 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 参与转录的物质 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板: DNA 酶: RNA聚合酶 其他蛋白质因子 转录的不对称性： 在RNA的合成中，DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板，称为转录的不对称性。 转录单元（transcriptional unit）----顺反子(cistron) A cistron is a term used to describe the locus responsible for generating a protein. It can also be defined as the segment of DNA that contains all the information for production of single polypeptide. In eukaryotic genetics, the concept is very similar to that of open reading frame, which is defined as a part of a gene which contains a sequence of bases which encodes for a complete protein. In eukaryotes, genes which function together in a single metabolic pathway may be located on different locations on a chromosome, or on different chromosomes altogether. In contrast, in prokaryotes, these genes are often located near each other, and are subject to a common polycistronic regulatory mechanism. A cistron can also correspond to the start and stop signals of the DNA. 单顺反子mRNA与多顺反子mRNA （一） 启动子(promoter) 原核生物启动子结构 原核生物启动子结构 原核生物核心启动子与扩展启动子 原核生物启动子 1987年，Calvin Harley and Robert Reynolds 发表了对263个噬菌体、质粒和细菌启动子的分 析结果，表明-35序列和-10序列六碱基的基序 （motif）高度保守，并且在92%的两个基序间有 17±1核苷酸的间隔区（spacer）。 转录起始点几乎均为嘌呤A或G。 原核生物启动子的突变效应 强启动子与弱启动子 本质区别在于启动子序列与标准启动子序列相似性 程度的大小。 标准序列： TTGACA 17±1 TATAAT ara BAD CTGACG 18 TACTGT rec A TTGATA 16 TATAAT lac UV5 TTTACA 18 TATAAT lac野生型启动子 TTTACA 18 TATGTT 原核生物启动子的突变效应 上调突变与下调突变 对于一个经过自然选择而保留的野生型启动子 而言，如果发生一个突变使启动子偏离标准序 列，启动子效应减弱，该突变就将表现为下调 突变；反过来，如果一个突变使启动子更接近 于标准序列，启动子效应增强，则该突变表现 为上调突变。 原核启动子序列多样性的生物学意义 说明了生物对环境的适应性 反应了mRNA转录调控的一种早期方式 生物在长期进化进程中，并不是所有基因都需要同等程度的表达 不同形式的RNA聚合酶识别不同的启动子 通过聚合酶与启动子的结合效率对mRNA分子的表达数量进行严格控制，也是一种最为经济有效的调控机制。 真核生物启动子 真核生物RNA的转录分别由3种RNA聚合酶 完成，与其相对应的基本启动子也有3类。 启动子Ⅱ最为复杂，它和原核启动子有很多 不同。 ● 真核生物RNA聚合酶 hnRNA 核内不