分子生物学课件第二章从dna到rna.ppt

第二章 生物信息的传递（上） ——从DNA到RNA 参与转录的物质 原料:NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板:DNA 酶: RNA聚合酶 其他蛋白质因子 转录的不对称性： 在RNA的合成中，DNA的二条链中仅有一条链可作 为转录的模板，称为转录的不对称性。 ● 转录的基本过程 ● 转录机器的主要成分 ● 启动子与转录起始 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 模板识别 转录起始 转录延伸 转录终止 3、转录延伸 转录的延伸：RNA聚合酶离开启动子，沿DNA 链移动并使新生RNA链不断伸长的过程。 RNA聚合酶成功地合成9个以上核苷酸并 离开启动子区，释放σ因子，转录进入正常 的延伸阶段。 大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析 RNA聚合酶与DNA聚合酶的区别 （三） 启动子(promoter) ● 真核生物启动子 真核有三种不同的启动子和有关的元件 启动子Ⅱ最为复杂，它和原核的启动子有很多不同 真核生物启动子 核心启动子 ●定义：指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区 上游启动子元件 ●包括CAAT盒（CCAAT）和GC盒（GGGCGG）等 1、增强效应十分明显，一般能使基因转录频率增加10-200倍。经人巨大细胞病毒增强子增强后的珠蛋白基因表达频率比该基因正常转录高600-1000倍!2、增强效应与其位置和取向无关，不论增强子以什么方向排列（5→3或3→5），甚至和基因相距3kp，或在基因下游，均表现出增强效应；? 3、顺式调节，只调节位于同一染色体上的靶基因； 4、增强效应有严密的组织和细胞特异性，说明只有特定的蛋白质（转录因子）参与才能发挥其功能；5、没有基因专一性，可以在不同的基因组合上表现增强效应。 ? 抗终止 RNA生物合成抑制剂 定义：能阻断、抑制或干扰RNA的代谢过程，最终抑制转录的一类化合物，称RNA生物合成抑制剂。 分类： 按照抑制剂作用性质的不同可分为三类 第一类是嘌呤和嘧啶类似物 ——形成核苷酸类似物而抑制RNA合成 第二类是通过与DNA结合而改变模板的功能 如：放射线素D 、EB等 第三类是与RNA聚合酶结合而影响其活力， 如有些抗生素或化学药物，由于能抑制RNA 聚合酶，因而抑制RNA的合成。 1、利福霉素 机制：抑制RNA聚合酶的活性，因而抑制细菌RNA的合成 2、利迪链菌素 机制：与RNA聚合酶β亚基结合，抑制转录过程中RNA链的延长。 3、α-鹅膏蕈碱 机制：抑制真核生物RNA聚合酶 5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸（m7Gppp）。mRNA5’端的这种结构称为帽子（cap）。 真核mRNA5?加帽过程 帽子结构功能： ①能被核糖体小亚基识别，促使mRNA和核糖体的结合； ②m7Gppp结构能有效地封闭mRNA 5’末端，以保护mRNA免受5’核酸外切酶的降解，增强mRNA的稳定。 2、3’端加尾 多聚腺苷酸尾巴功能： 1、增加mRNA的稳定性 2、增加翻译的效率。 需poly（A）结合蛋白（poly(A) binding protein, PABP)的存在。 3、与mRNA从细胞核到细胞浆的转运有关。 3、RNA的剪接 生物体内内含子的主要类型：Ⅰ类内含子、Ⅱ类内含子;GU-AG、AU-AC Ⅰ类内含子的自我剪接 参与RNA剪接的物质： snRNA（核内小分子RNA） snRNP（与snRNA结合的核蛋白） U1snRNP 与 U2snRNP 的部分序列分别和5′剪接点与分支点A附近的序列能互补结合 4、RNA的编辑 编辑（editing）是指转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。 尿苷酸的缺失和添加 1986.R.Benne在研究锥虫线粒体mRNA转录加工时发现mRNA的多个编码位置上加入或丢失尿苷酸，1990年在高等动物和病毒中也发现了编辑现象。 锥虫coxII 基因的编辑 RNA编辑的意义 RNA编辑可增加基因产物的多样性。 RNA编辑与生物发育和分化有关，是基因调 控的一种方式。 （五）原核生物与真核生物mRNA的特征比较 1、原核生物mRNA的特征 ● 半衰期短 ● 多以多顺反子的形式存在 ● 5’ 端无“帽子”结构， 3’ 端没有或只有较短的poly（A ）结构。 2、真核生物mRNA的特征 原核生物和真核生物mRNA结构的比较 1、下列有关TATA盒(Hognessbox)的叙述,哪个是正确的: A.它位于第一个结构基因处B.它和RNA聚合酶结合C.它编