201512211.2基因工程的基本操作程序(上课用).ppt

小结 构建过程 2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②受体细胞：受精卵 ③程序： 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定： 3、将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法： Ca2+处理法 Ca2+处理细胞 细胞壁通透性增大 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 类型 步骤 检测内容 方法 结果显示 分子检测 第一步 第二步 第三步 个体生物学水平鉴定 四、目的基因的检测与鉴定 转基因生物的DNA上是否插入了目的基因 DNA分子 杂交技术 是否显示 出杂交带 目的基因是否 转录出mRNA 分子杂交技术（DNA和mRNA） 同上 目的基因是否 翻译出蛋白质 抗原 ——抗体杂交 同上 包括做抗虫、抗病的接种实验，以确定是否有抗性 以及抗性的程度；基因工程产品与天然产品的功能 进行活性比较，以确定功能是否相同 目的基因成功表达的标志：通过转录翻译合成蛋白质 归纳步骤 8.利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类