现代分子生物学第3版总复习
分子生物学总复习 酵母双杂交系统的基本原理 酵母双杂交系统巧妙地利用了真核生物转录调控因子的组件式结构(modular)特征,酵母转录因子GAL4 的DNA结合结构域 BD 和转录激活结构域 AD 是转录激活因子发挥功能所必须的。只有当他们在空间上接近时才能行使激活转录的功能。 将编码待测蛋白的基因分别与编码BD及编码AD基因构成融合基因,并导入酵母细胞中。如果待测蛋白间存在相互作用,则转录因子GAL4发挥作用,促使报告基因表达;如果待测蛋白间不存在相互作用,则转录因子GAL4不能发挥作用,报告基因不表达。 各种作图法比较 限制性作图快速,可提供详细信息,但不适合大基因组。 荧光原位杂交操作困难,资料积累慢,一次实验定位的分子标记不超过3-4个。 绘制详细的物理图还须寻找更有效方法。 第7章 基因的表达与调控(上) ——原核基因表达调控模式 7.1.1 基因表达调控的基本概念 二、基因表达的方式:组成型表达及适应型表达 1、组成型表达(constitutive expression) :指不大受环境 变动而变化的一类基因表达。如DNA聚合酶,RNA聚合酶等 代谢过程中十分必需的酶或蛋白质的表达。 某些基因在一个个体的几乎所有细胞中持续表达,通常被称 为管家基因(housekeeping gene)。 管家基因无论
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