第三章dna的复制、突变和修复.pptVIP

DNA的复制、突变、损伤和修复 主要内容 第一节 DNA的复制 一、 DNA复制的一般特征 二、 原核生物的DNA复制 三、 真核生物的DNA复制 四、 线粒体DNA复制 五、 噬菌体和病毒DNA的复制 DNA复制的特征 (一) 半保留复制 (二) DNA复制的起点等 （三）DNA复制的酶系 (四) DNA的复制过程 半保留复制 复制的起始等 复制起点（origin of replication）：复制开始的特定位点，用ori或O表示。（含AT） 复制子（replicon）：由一个复制原点引发的一整个复制单元。 复制开始的引物（primer）：引物大多是RNA，一般为1～ 10个核苷酸。 复制的起始等 复制叉（replication fork） 复制的起始等 复制方向：多数双向复制，少数单向进行 复制的起始等 复制终止： 环状DNA：有特殊的终止位点，或者通过简单碰撞而终止 线状DNA：串联体模型 DNA复制的酶学 使DNA链解离的酶 （1）解旋酶（helicase）:DnaB(E.coli) （2）单链DNA结合蛋白（single-strand protein，SSB） （3） DNA旋转酶（拓扑异构酶Ⅱ，topoisomerase） DNA聚合酶 DNA聚合酶Ⅰ和Ⅲ的功能 真核生物DNA聚合酶 DNA连接酶 复制方式 DNA复制的过程 5? DNA复制过程 原核生物的DNA复制 (一) 复制原点 (二) 复制起始 （三）复制终止 两个复制叉在终止区域相遇 ，终止区域是22bp DNA并结合特异的蛋白 真核生物的DNA复制 (一) 复制原点 (二) 复制起始 （三）复制终止 1、端粒的复制 2、端粒酶与药物 端粒的复制 人的端粒的序列： 是由端粒酶催化产生。 端粒酶是一种含有短的RNA分子的蛋白质复合体，具有逆转录酶活性。 端粒酶的结构 端粒酶的作用 （1）RNA和蛋白亚基组成 （2）RNA为合成端粒DNA的模板，对保持端粒酶活性极为重要 （3）是逆转录酶 端粒酶与药物 （1）针对端粒酶中的RNA或端粒酶活性催化亚基设计反义核苷酸 （2）核酶 （3）逆转录酶抑制剂：如3′-叠氮胸苷（ 3′-azidothymidina，AZT） 线粒体DNA复制 重链（H链）：含有较多的G的链 轻链（L链）：含有较多的C的链 复制过程：D环复制 噬菌体和病毒DNA的复制 (一) 单链环状DNA的复制 (二) 线状DNA的复制 （三）逆转录病毒 1、逆转录病毒的复制 2、逆转录病毒与疾病 3、HIV与药物 逆转录病毒 （一）逆转录病毒的发现 （二）逆转录病毒的复制 （三）逆转录病毒与疾病 逆转录病毒的发现 1964年，Temin等发现RNA肿瘤病毒的增殖可以被DNA合成抑制剂所遏制。 1970年，Temin和Baltimore分别在RNA肿瘤中发现了逆转录酶 逆转录酶的活性 RNA指导的DNA聚合酶活性 DNA指导的DNA聚合酶活性 RNAaseH活性：可以从5`→3`和3`→5`方向水解DNA-RNA杂合分子中的RNA 逆转录病毒的复制 逆转录病毒的复制 逆转录病毒的终产物DNA的长度比逆转录病毒正链RNA要长，其5`端多了序列U3，3`端多了U5 病毒DNA双链分子由病毒编码的整合酶整合到宿主DNA中 逆转录病毒的复制 原病毒：宿主细胞DNA序列中插入的病毒DNA 原病毒借助宿主细胞的RNA聚合酶进行转录，产生大量病毒RNA，翻译成大量病毒蛋白质 逆转录病毒与疾病 1976年，Varmus和Bishop发现鸟类肉瘤病毒中含有致癌基因（1989年获诺贝尔奖） 逆转录病毒与疾病 癌基因（oncogene）：能导致正常细胞发生癌变的一类基因 细胞癌基因（cellular oncogene，c-one）：人和动物细胞细胞中的癌基因 原癌基因：未活化的c- one 病毒癌基因：病毒基因组中癌基因的同源序列 HIV是艾滋病的病因 HIV病毒 核心蛋白含有RNA基因组和逆转录酶，外壳是磷脂双层 HIV病毒的宿主细胞 入侵机体的三种细胞：携带CD4受体的T细胞、巨噬细胞和树突状细胞 艾滋病的流行全球统计数字 HIV与药物 核苷类似物 非核苷类似物 HIV-1蛋白酶的抑制剂 核苷类似物 3′-叠氮脱氧胸苷（azidothymidine，AZT），双脱氧肌苷（ddI）和双脱氧胞苷（ddC） 作用机制：AZT掺入病毒DNA中，由于AZT缺乏3′-OH，所以使病毒DNA合成终止 副作用：骨髓抑制、贫血、神经系统疾病和胰腺炎；诱导HIV基因