实验注意事项-生命学院实验中心-兰州理工大学.doc

兰 州 理 工 大 学 实验指导书（四年制生物工程专业） 冷非凡 编写 生命科学与工程学院 二零一年月 目 录 实验注意事项 2 实验一 小型发酵罐的使用及细菌分批培养动力学实验 4 实验二 酵母细胞的固定化及其酒精发酵实验....................................8 实验三 淀粉质原料的酒精发酵实验..................................................10 实验四 用两种分离技术提取柠檬酸的工艺比较..............................13 实验五 酸凝乳的制备..........................................................................19  实验注意事项 通过本门实验课程的学习，培养学生对科学研究工作的严肃态度、严密的工作方法和实事求是的作风，训练缜密的逻辑思维能力，让学生真正掌握现有的和最新的生物工程技术综合实验技能，提高学生的综合动手能力和实验素质。要求学生通过实验能够理解实验原理及实验方案，掌握正确的操作规程；掌握相关仪器设备的使用方法，了解其性能参数、适用范围及注意事项，各种参数的测定方法；掌握生物工艺学领域中常用的实验技术。 为达到上述目的，要求做到以下几点： 实验前： 仔细阅读实验指导书，了解实验的目的、要求、方法、操作步骤、注意事项及可能用到的关键仪器设备，领会实验原理及提前学习相关仪器设备的使用方法； 结合实验内容，复习有关生物工艺学、微生物学、生物工业分析等的理论知识，做到充分理解； 预测实验中各个步骤可能出现的情况或异常现象； 注意实验中可能发生的问题。 实验中： 将实验仪器妥善安排，正确装置； 严格按照实验指导书上的步骤进行操作，注意人身安全及实验室安全； 认真、细致地观察实验过程中出现的现象，随时记录各项指标、原始数据及实验现象； 爱护仪器设备和用具，节约药品、试剂及水电，保持实验室的安静整洁。 实验后： 整理实验仪器、玻璃耗材，清洗干净后妥善放置； 做好实验室的清洁卫生及安全工作； 分析实验结果，整理实验数据，经过分析思考，独立撰写实验报告，按时交给指导教师。 实验报告的内容要求及写作规范 通过本课程的实验和实习，培养学生理论联系实际、严肃认真、实事求是的科学态度，要求遵守纪律、安全操作，确保实验顺利进行。 实验前必须了解实验操作内容和有关课程内容，明确实验目的及操作规范，独立思考、认真观察、详细如实记录，按时完成实验并按规定完成实验报告。 实验报告的内容主要包括实验目的、原理、材料和方法、操作步骤、实验结果及分析。所有实验应准确记录各实验技术参数，并对实验结果进行讨论。 课程成绩由勤、课堂提问回答、实验操作动手能力、实验报告等部分组成。  灭菌注意事项： 实验二 酵母细胞的固定化及其酒精发酵实验 一、实验目的 1、学习酵母菌细胞的固定化方法； 2、进一步理解酒精发酵的原理。 二、实验原理 采用物理或化学的方法固定微生物细胞，以微生物在固定化后的生长状态可分为：固定化死细胞、固定化活细胞和固定化增殖细胞三类。固定化死细胞是指在固定化前或固定化后对微生物细胞进行加热、冷冻、干燥、表面活性剂、化学试剂等处理，使细胞处于死亡状态；固定化活细胞是指在固定化后细胞仍存活但并不增殖；固定化增殖细胞是指固定化后细胞不仅存活，而且在使用过程中还能增殖。这三类固定化细胞中，最令人感兴趣的是固定化增殖细胞，因为多数微生物代谢的产物与其生长相关。 固定化细胞就是被限制自由的细胞，即采用物理或化学的方法将细胞固定在载体上或限制在一定的空间界限内，但细胞仍保留催化活性并能反复或连续使用。 微生物细胞的固定化方法有吸附法、包埋法和不用载体法。固定化细胞的活力及其它性质与游离细胞有所不同，细胞经固定化后，一般细胞的稳定性增加，固定化细胞的最适反应温度一般较游离细胞的高，最大反应速度大多与游离细胞相同，饱和常数与游离细胞相比有的不变，有的变化很大，这可能是由于载体与底物间静电相互作用以及存在扩散效应的缘故。 本实验采用包埋的固定化方法，把酵母细胞悬浮在海藻酸钠溶液中，再滴加入CaCl2溶液，形成海藻酸钙凝胶小球，细胞包埋在凝胶的小孔中，制成固定化细胞。 三、实验材料 1、酵母菌细胞：酒精活性干酵母，或新鲜的斜面酵母菌种。 2、2.5%海藻酸钠溶液40mL（海藻酸钠比较难溶，配制时需在加热条件下溶解，并不断搅拌，使其成为均匀的胶体溶液）；2% CaCl2溶液100 mL。 3、培养基 ① 增殖培养基：蔗糖5%，蛋白胨0.5%，MgSO4·7H2O 0.1%，KH2PO4