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4种病原弧菌外膜蛋白的提取及抗原性初步分析

4 种病原弧菌外膜蛋白的提取及抗原性初步分析 , , , , , ( , 222005) 摘要: 利用十二烷基磺酸钠抽提并结合超速离心的方法提取了鳗弧菌( Vibrio anguillarum) 、河口弧菌 ( V.aestuarianus) 、霍乱弧菌( V.cholerae)和副溶血弧菌( V.parahaemolyticus)4 种致病性弧菌的主要外膜蛋 白, 通过 SDS分析比较 4 种弧菌主要外膜蛋白的组分。结果表明: 4 株弧菌的外膜蛋白电泳图谱 一般可得到 5 ~10 条蛋白带, 分子量多数集中在 26~40 kD 和 48~85 kD 。对所提取的 4 种弧菌主要外 膜蛋白进行 SDS后, 分别与自制的兔抗鳗弧菌血清、抗河口弧菌血清、抗副溶血弧菌血清进行 Western-blotting 印迹分析。结果显示每种全菌抗血清可与相应菌的外膜蛋白部分组分发生免疫反应, 并与其他 3 种弧菌外膜蛋白的部分组分产生交叉免疫反应, 这些反应条带分子量主要集中于 30~48 kD 之间。本研究为进一步研究致病性弧菌外膜蛋白免疫学特性提供参考。 关键词: 鳗弧菌( Vibrio anguillarum); 河口弧菌( V.aestuarianus); 霍乱弧菌( V.cholerae); 副溶血弧菌 ( V.parahaemolyticus); 外膜蛋白; Western-blotting 印迹 中图分类号: S94 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2012)05-0071-04 ( Vibrio) 4 (Vibriosis), , , 4 , , , 1 材料和方法 (Outer 1.1 供试菌株 Membrane Protein, OMP), (BH1 )(TS1 ) , , ( ) , (Cynoglossus semilaevis L.); , (JGB080708-1 ) (Litopenaeus vannamei L.); , (LD081008B-1 ) , (Misgurnus anguillicaudatus L.), , , 1.2 免疫血清的制备 1.2.1 4 , 28 ,

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