消岩汤含药血清介导下SurvivinsiRNA对.PDFVIP

２０ 17 年2 月第34 卷第2 期 天 津 中 医 药 Feb. ２０ 17熏Ｖｏｌ ．34 Ｎｏ ．2 Ｔｉａｎｊｉｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 113 DOI ：10.11656/j .issn.1672-1519.20 17.02.12 ·实验研究 · 消岩汤含药血清介导下 Survivin siRNA 对 人肺腺癌A549 细胞增殖及凋亡的影响* 1,2 2 2 2 张 欣 ，贾英杰 ，杨佩颖 ，张蕴超 （1.天津中医药大学研究生院，天津 300 193 ；2.天津中医药大学第一附属医院肿瘤科，天津 300 193 ） 摘要 ：[ 目的] 分析消岩汤含药血清介导下Survivin siRNA 对人肺腺癌A549 细胞增殖及凋亡的影响，探究其抑瘤 机制。[方法] 在Invitrogen 公司的网上设计系统中设计靶向Survivin 基因的siRNA 序列，并将其转染A549 细胞,应用 噻唑蓝（MTT ）法检测消岩汤以及转染组对A549 细胞生长抑制的情况，免疫组化法观察A549 细胞Survivin 蛋白的表 达情况，流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。[结果] MTT 法显示消岩汤具有抑制A549 细胞生长的作用，其作用具有 一定的时间依赖性，转染中药组的抑制率显著高于转染对照组及非转染中药组。经免疫组化法检测，转染对照组对 Survivin 蛋白表达的抑制率明显高于非转染中药组，但显著低于转染中药组。流式细胞术检测结果显示消岩汤及重组 质粒以诱导细胞晚期凋亡为主，转染中药组A549 细胞凋亡率显著高于其他各组。[结论] 消岩汤可诱导A549 细胞的 凋亡，联合应用转染靶向Survivin 基因的重组质粒可增强其体外诱导A549 细胞凋亡的作用。 关键词 ：消岩汤；Survivin siRNA ；A549 ；细胞增殖；凋亡 中图分类号 ：R285.5 文献标志码 ：A 文章编号 ：1672-1519（2017）02-0 113-04 肺癌是当今世界上发生率和病死率最高的恶 天津中医药大学第一附属医院院内制剂，制剂号 [1] 性肿瘤之一，且呈上升趋势 。另有国外资料显示肺 400 19 ，由黄芪、太子参、夏枯草、姜黄、郁金、白花蛇 癌的病理学类型发生了明显变化，肺腺癌发病率迅 舌草组成。严格按照院内制剂标准进行制备。取健康 速增加，目前已取代肺鳞癌的发生率，成为最常见 BalB/C 小鼠，体质量 18~22 g ，分为2 组，每组20 只， [2] 的肺癌病理类型 。与其他恶性肿瘤一样，非小细 分为空白对照组和中药组，中药水煎剂的剂量均以 胞肺癌的侵袭、转移是多基因参与、多步骤发生的 生药量计，根据前期急性毒性实验证明，消岩汤的 [3] 过程，与一系列的基因表达失衡相关 。探讨临床应 最大给药剂量为304 g/kg ，相当于成人临床推荐日 [7] 用最为广泛的中药复方的抗肿瘤机制，是目前研究 用量的130 倍，未出现明显毒副作用 。前期研究证