第6章2真菌类的遗传学分析.ppt

二、着丝粒作图（centromere mapping） ●把着丝粒作为一个座位（locus)，利用四分子分析法，测定基因与着丝粒间的距离。 1、原理： ⑴ 如果基因与着丝粒之间无交换： 则该基因与着丝粒同步分离，基因分离发生的时期在减数分裂Ⅰ； 基因与着丝粒之间没有发生交换 二、着丝粒作图（centromere mapping） ●把着丝粒作为一个座位（locus)，利用四分子分析法，测定基因与着丝粒间的距离。 1、原理： ⑴ 如果基因与着丝粒之间无交换： 则该基因与着丝粒同步分离，基因分离发生的时期在减数分裂Ⅰ； ⑵ 如果基因与着丝粒之间发生交换： 则该基因与着丝粒的分离不同步，基因分离发生的时期在减数分裂Ⅱ。 着丝粒作图(图示:减数分裂的第一次分离) 着丝粒作图（图示：减数分裂的第二次分离） 二、着丝粒作图（centromere mapping） ●根据8个子囊孢子基因型的排列顺序确定交换型和非交换型。 ●例如： ----正常野生型：能在红色面包霉基本培养基上生长，子囊孢子成熟后呈黑色。记作lys＋或＋ ----赖氨酸缺陷型：是一种突变型，不能自我合成赖氨酸，成熟较迟，呈灰色，易于鉴别。记作lys－或－。 ( lys mutants are unable to synthesize their own lysine. ) 三、链孢霉的连锁与交换 ●利用两个不同交配型进行杂交： nic ＋ × ＋ ade nic（nicotinic acid）为烟 (菸)酸依赖型 ade（adenine）为腺嘌呤依赖型。 ●两对基因的杂交实验，可产生6×6种不同的子囊型，归纳为7种基本的的子囊型 表6-5 链孢霉nic+×+ade的7种不同子囊型及相应的子囊数 重组值的计算 1、nic和着丝粒间的重组值 重组值的计算 2、ade和着丝粒间的重组值 确定两个基因与着丝粒相对位置的另一种方法 计算着丝粒与ade之间被低估的重组值 ● 5.05%＋5.20%－9.3%＝0.95% ● 要了解重组值究竟是怎样被低估的，见P209 习题14 真菌类遗传分析与果蝇连锁分析的异同 ●在脉孢菌中，8个子囊孢子按顺序排列在子囊中，这使着丝粒作图成为可能，而对于非顺序四分子和高等动植物则不可能进行着丝粒作图。 ●统计对象不同，果蝇遗传作图统计的是测交后代的表型数，脉孢菌遗传分析统计的是子囊类型及其数目。 ●在顺序四分子的遗传分析中，通过分析7种基本子囊类型的起源，可以对染色单体的干扰进行分析，这在果蝇的三点测交中是不可能的。 ●无中生有为隐性， 隐性伴性看女病， 父女都病是伴性； ●有中生无为显性， 显性伴性看男病， 母女都病是伴性。 外祖父法 根据外祖父的表型确定母亲的双杂合体的连锁相（顺式或反式）； 然后判断其儿子的各种表型中哪些属于重组型，统计其重组体的比例，计算两个基因之间的重组率，确定两个基因之间的相对距离。 用这种方法测得色盲基因与G-6-PD 基因的相对距离约为5cM（平均每20个儿子中有1个重组体）。 体细胞杂交定位法 有些人类性状或疾病基因可以在体外培养的杂种细胞中表达，对这些疾病基因可用体细胞杂交的方法进行定位。 体细胞是生物体除生殖细胞外的所有细胞。 细胞杂交又称细胞融合（cell fusion），是将来源不同的两种细胞融合成一个新细胞。 大多数体细胞杂交是用人的细胞与小鼠、大鼠或仓鼠的体细胞进行杂交。这种新产生的融合细胞称为杂种细胞（hybrid cell)，含有双亲不同的染色体。 杂种细胞有一个重要的特点是在其繁殖传代过程中出现保留啮齿类一方染色体而人类染色体则逐渐丢失，最后只剩一条或几条，其原因至今不明。 这种仅保留少数甚至一条人染色体的杂种细胞正是进行基因连锁分析和基因定位的有用材料。 由于人和鼠类细胞都有各自不同的生化和免疫学特征，Miller等运用体细胞杂交并结合杂种细胞的特征，证明杂种细胞的存活需要胸苷激酶（TK）。 凡是含有人第17号染色体的杂种细胞都因有TK活性而存活，反之则死亡。从而推断TK基因定位于第17号染色体上（表6.6）。 这是首例用细胞杂交法进行的基因定位。由此可见，研究基因定位时，由于有杂种细胞这一工具，只需要集中精力于某一条染色体上，就可找到某一基因座位。 表6.6 杂种细胞系的染色体和TK活性 细胞系 人类染色体 TK活性 （1） 5，9，12，21 － （2） 3，4，17，21 ＋ （3） 5，