脱细胞真皮基质材料研究及应用.pdfVIP

中华损伤与修复杂志(电子版)2009年第4卷第4期ChinJInjuryRepairandWoundHealing(ElectronicEdition)，August2009，Vol4,No．4 · 综述 ． 脱细胞真皮基质材料 的研究及应用 史新立 谭芳奕 陈冰 脱 细 胞 真 皮 基 质 (acellulardermalmatrix， 的基底膜及皮肤附属器官周 围结缔组织成分均被破 ADM)的研究经历了漫长的过程，1985年Heck等 报 坏 。Dispasell同时也破坏了纤维细胞和结缔组织基质 道应用异体真皮作为 自体表皮的移植载体 ，将二者复 问 的 连 接 ， 更 有 利 于 TritonX2100的 浸 透 。 合移植于动物模型和烧伤患者的切痂创面，取得了较 TritonX2100属于非离子型表面活性剂，在溶液中稳 好的创面修复和抑制瘢痕增生的效果。但此后的应用 定性高，不易受强电解质无机盐存在的影响，能与生 和研究发现，同种异体皮肤移植所引发的免疫排斥反 物膜中的磷脂等脂质结合形成复合物 ，溶解于溶液 应主要源于表皮细胞、内皮细胞和成纤维细胞等，由 中。同时，TritonX2100中的疏水端也能和膜蛋 白破坏 此推动真皮的无细胞化研究。时至今 日，ADM修复皮 生物膜，从而使细胞溶解破坏。该法细胞脱除彻底， 肤黏膜缺损和进行软组织充填的有效性已经被动物实 但同时基底膜结构破坏大，相对不利于上皮细胞底黏 验和初期临床应用试验所证明，是一种较为理想的真 附生长 。 皮替代物 。ADM是 由动物或人类皮肤制成的无细胞组 (2)高渗盐一SDS法 织薄片。它去除了皮肤的全层表皮及真皮层中的全部 皮肤标本先经高渗盐作用 (1mol／LNaC1溶液， 细胞成分 ，而保 留了真皮的胶原成分和组织基本结 37℃下作用24h)使锚着细丝与表皮基底细胞的半桥粒 构，同时也保留了基底膜成分。由于皮肤移植中的排 分离 ，从而完整地去除表皮。然后在未改变胶原结构 斥反应主要是 由细胞免疫引起，在去除了具有较强免 的情况下 ，再用破膜剂十二烷基硫酸钠(0．5％SDS溶 疫 原性的细胞成分后 ，以胶原蛋 白为主要成分 的 液 ，室温下作用1h)将皮肤标本中的细胞脱除。该法 ADM本身抗原性很低 ，几乎不引起宿主的排斥反应， 细胞脱除也比较彻底 ，基底膜完整保留，但真皮中Ⅳ 可以在宿主体内长期存留并最终被降解和引导正常组 型胶原 、纤维结合素 、弹力素 、HLA—DR等含量较 织重建 。 多，因此具有相对高的抗原性。 一 、 基本制备方法 (3)高渗盐--NaOH消蚀法 1．ADM的制备 该法利用高渗盐 (1mol／LNaC1溶液 ，37℃下作 ADM根据来源不同分为异体ADM和异种ADM两 用24h)去除表皮 ，同时再利用NaOH(低浓度溶液 ，室 种 ，制备过程都是尽可能地去除具有抗原性 的细胞 温下作用18h1中碱离子的吸水作用 ，夺取组织细胞的 (表皮细胞、毛囊 、皮脂腺、汗腺及真皮中血管内皮 水分 ，使细胞脱水而死亡，最后使用超声清洗仪清洗 细胞 、成纤维细胞等 )，保留完整的胶原纤维成分和 除去细胞。该法细胞彻底脱除，胶原纤维结构完整 ， 组织基本结构。早期人们曾利用反复冻融法、胰酶消 排列较正常松散。但要注意控~JINaOH的作用时间过 化法等制备ADM，但 由于这些方法不能完全去除真皮 长 (如36h)则会使胶原变性 ，蛋 白裂解 ，得到的是真 内细胞成分 ，导致ADM移植后引起宿主强烈的排斥反 皮皮浆。 应，而且制备过程也过于复杂 ，因而并未广泛开展。 (4)其他 随着 技 术 的改进 ， 目前ADM的制备 方 法 主 要有 Lee等 用胰蛋 白酶 (0．25％溶液 ，4℃下作用 Dis口aseII—Triton法、高渗盐一SDS法、高渗盐