生物制药速记版.doc

生物制药简化记忆版 _zhangyong 一、名词解释或填空知识点 生物技术：人类对生物资源的利用、改造并为人类服务的技术。 生物技术制药：利用现代生物技术，借助微生物、动物和植物生产医药品。 基因工程技术：将所要重组的目的基因插入载体，拼接后转入新的宿主细胞内构建成工程菌，实现遗传物质的重组，并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。 基因工程制药：在体外通过重组DNA技术对生物遗传基因进行剪切拼接，重新组合与适宜的载体连接构成完整的基因表达系统，然后导入宿主细胞内与原有遗传物质整合或以质粒形式单独在细胞中繁殖，并表达活性蛋白质、多肽或核苷酸药物的工艺过程。 微生物药物：微生物来源的药物，包括抗生素和具有其它药理作用的次级代谢产物和以微生物次级代谢产物为先导物通过生物或化学方法制得的衍生物。 生物制品：根据免疫学原理，用微生物代谢产物、动物毒素、人和动物的血液或组织等经加工制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂以及血液制品的通称。 基因表达：指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所有加工过程。 人工接头：由人工合成的连接在目的基因两端的含有某些限制酶切点的寡聚核苷酸片段。 干扰素：人体细胞分泌的一种活性蛋白质，具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节活性。 抗体(Ab)：能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗原（Ag）：能与淋巴细胞的抗原识别受体特异性结合，具有启动特异性免疫应答而且能与应答产物在体内发生特异性反应的物质。 葡萄糖效应：葡萄糖或某些容易利用的碳源，其分解代谢产物阻遏某些诱导酶体系编码的基因转录的现象。 单克隆抗体：针对一个抗原决定簇的抗体，又是单一的B淋巴细胞克隆产生的。 克隆化：单个细胞通过无性繁殖而获得细胞集团的整个培养过程。 互补决定区（CDR）：抗体分子和抗原分子发生特异性结合的关键部位。 酶联免疫原理：通过酶标记技术，将抗原抗体反应的特异性和酶催化作用的高效性相结合，利用酶反应底物的颜色变化判断结果。 前体：加入到发酵培养基中的某些化合物，能被微生物直接结合到产物分子中去，而自身的结构无多大变化，有些还具有促进产物合成的作用。 分叉中间体：既可以用来合成初级代谢产物，又可以用来合成次级代谢产物的中间体。 中间体：养分或有机质进入下一个途径后被转化成一种或多种不同物质，它们均被进一步代谢，最终获得该途径的终产物。 诱导物：能在生长期内促进抗生素合成的化合物，可被非前体结构类似物取代的物质。 超敏菌株：选择适当的细菌菌株，通过诱变剂处理获得对某种或某类抗生素敏感性提高几十倍或几百倍的菌株。 选择性毒性作用：对人体无毒性或毒副作用甚微，而对病原菌有显著抑制杀死作用。 改形抗体：用鼠源性单克隆抗体的CDR序列替换人Ig分子中的CDR序列。 问答、简述、填空等知识点 生物技术制药的特征：高技术、高投入、高风险、长周期、高收益、低污染。 反转录法过程：Ⅰ、mRNA的纯化。Ⅱ、cDNA第一链的合成。Ⅲ、cDNA第二链的合成。Ⅳ、cDNA克隆。Ⅴ、将重组体导入宿主细胞。Ⅵ、cDNA文库的建立。Ⅶ、目的cDNA克隆的分离和鉴定。 影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素：①外源基因的剂量②外源基因的表达效率③表达产物的稳定性④细胞的代谢负荷⑤工程菌的培养条件 影响目的基因在酵母菌中表达的因素：①外源基因的剂量②外源基因的表达效率③外源蛋白的糖基化④宿主菌、株的影响 基因工程菌质粒不稳定性分为分裂不稳定性和结构不稳定性，，分裂不稳定性是指分裂时出现一定比例不含质粒的子代菌现象，结构不稳定性指DNA从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变。此外，质粒的拷贝数，培养条件（比生长速率的控制）也决定了质粒稳定性。 提高质粒稳定性方法：①选择合适宿主菌②选择合适载体③选择压力④分阶段控制培养⑤控制培养条件⑥固定化 基因工程药物与传统药物区别：①利用活的细胞作为表达系统来制备产品②基因工程药物是一些必需蛋白质分子③产生许多杂质和有害物质。 基因工程药物特点：①目的产物在初始物料中含量低②含目的产物的初始物料组成复杂③目的产物的稳定性差④种类繁多⑤应用面广⑥对其质量纯度要求高，甚至要求无菌无热源 单克隆抗体制备过程：①抗原与动物细胞免疫②细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养③筛选阳性克隆与克隆化④杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定⑤单克隆抗体的大量制备⑥单克隆抗体的纯化 筛选杂交瘤细胞：选择培养基为HAT，H是指次黄嘌呤，A是指氨基蝶呤。T是指胸腺嘧啶。其中，A能阻断DNA合成的主要途径，瘤-瘤细胞、瘤细胞因缺失DNA中间合成途径而死亡，脾-脾细胞、脾细胞传代数在10代之内后死亡，脾-瘤融合杂交瘤细胞能利用HGPRT和H、T来合成DNA，并具有无限增值的能力。 青霉素产生菌是产黄青霉，按作用对象是抗感染类，按作用性