2018届一轮复习苏教版无菌操作技术教案.doc

选修1　生物技术实践 第1讲　无菌操作技术 考点一| 微生物的分离和培养 1．相关技能、技术和方法 (1)无菌操作的技能——灭菌 分类：实验室常用高温处理达到灭菌效果，包括干热灭菌和湿热灭菌。 作用：微生物分离和培养的基础。 关键：防止外来杂菌的入侵。 (2)配制培养基 培养基概念： 为人工培养微生物而制备的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养物质。 分类：按化学性质的不同分为天然培养基和合成培养基。 (3)接种微生物 接种：指在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。 接种方法和常用工具(连线) 接种方法　　　　常用工具 .涂布平板接种　　a．接种针 .穿刺接种　 b．接种环 .斜面接种 c．玻璃涂布器 .平板划线接种 【答案】　－c　－a　－b　－b 2．大肠杆菌的接种与分离培养 (1)配制牛肉膏蛋白胨培养基 其操作步骤：配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面。 (2)斜面接种和培养大肠杆菌 主要目的：菌种转移、扩大培养和保存纯净菌种等。 主要步骤：准备接种→接种环灭菌→试管口灭菌→挑取少许菌种→划线接种→在37_恒温箱中培养大肠杆菌24 h→将增殖的菌种放置在冰箱的冷藏室中(4 )保存。 (3)平板划线分离和培养大肠杆菌 平板的作用：培养、分离细菌等微生物。 平板划线法是指用带有微生物的接种环在平板培养基表面通过分区划线而纯化分离微生物的一种方法。 1．培养基 (1)培养基的成分 营养物质 含义 作用 主要来源 碳源 能提供碳元素的物质 构成生物体的物质，异养生物的能源物质 无机物：CO2、NaHCO3；有机物：糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等 氮源 能提供氮元素的物质 合成蛋白质、核酸以及含氮代谢产物 无机物：N2、NH3、氨盐、硝酸盐；有机物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等 生长因子 生长必不可少的微量有机物 酶和核酸的成分 维生素、氨基酸、碱基等 水 细胞生命活动必不可少的物质 不仅是良好的溶剂，还是结构物质 培养基、大气、代谢产物 无机盐 提供除碳、氮元素以外的各种重要元素，包括某些大量元素 细胞内的组成成分，生理调节物质；某些化能自养型细菌的能源；酶的激活剂 培养基、大气 (2)培养基的分类 种类 特点 应用 物理性质 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 固体培养基 加凝固剂 微生物的分离、鉴定、活菌计数、保藏 化学成分 天然培养基 含化学成分不明的天然物质 工业生产 合成培养基 培养基成分明确或用一定化学物质配制 分类、鉴定 用途 选择培养基 添加某物质，抑制杂菌生长，促进所需微生物生长 培养分离出特定微生物 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂 鉴别微生物 2.无菌技术 视角　 微生物的分离和培养 1．(2017·江西赣中南五校第一次联考)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂 含量(g) 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL (1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于__________。 (2)若根据用途划分，该培养基属于__________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必需怎样更改？__________，并用__________作为指示剂。 (3)在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行__________；操作者的双手需要进行清洗和__________。 (4)图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是：______________和______________，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的__________。 图1　　　　　　　　图2 【解析】　(1)大肠杆菌只能从环境中摄取有机物，不能自己合成有机物，属于分解者。(2)该培养基中含有指示剂，属于鉴别培养基。尿素分解菌可以分解尿素，而其他微生物不能，因此可将培养基中的蛋白胨改为尿素用于筛选土壤中的尿素分解菌，并用酚红作为指示剂，尿素分解菌分解尿素产生了NH3可使酚红变红。(3)培养微生物时，培养基和培养皿需要灭菌，操作者双手需要进行消毒。(4)图1采用的是稀释涂布平板法，图2采用的是平板划线法。单个微生物细胞繁殖所形成的细胞群叫菌落。 【答案】　(1)分解者　(2)鉴别　将蛋白胨改成尿素　酚红　(3)灭菌　消毒　(4)稀释涂布平板法　平板划线法　菌落 2．常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培