牛种布鲁菌virB4基因酵母表达载体的构建.pdfVIP

Heilongjiang Animal Science 14 and Veterinary Medicine № 7 20 10 牛种布鲁菌virB4 基因酵母表达载体的构建 1 1 1 2 1 ， ， ， ， 郭 乾 陈创夫 张 辉 王 勇 任 艳 (1． ， 832000 ; 石河子大学动物科技学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室 新疆石河子 2 ． ， 832003) 石河子大学生命科学学院 新疆石河子 中图分类号:S855 ． 1 + 2 文献标识码:A 文章编号:1004 7034 (20 10)06 － 00 14 － 03 :RB51 ; ;virB4 ; Y187 关键词 Ⅳ型分泌系统 酿酒酵母菌 : GenBank RB51 virB4 ， virB4 ， 摘 要 根据 中的牛种布鲁菌 株 基因保守序列设计引物 扩增 基因 将其 pMD18 － T ， pGBKT7 ， Y187 克隆到 载体上 鉴定正确后与酵母表达载体 进行连接 转化酿酒酵母菌 后 PCR 、 ， Y187 进行 酶切鉴定 阳性克隆测序分析后转化酿酒酵母菌 感受态细胞进行自激活和毒性检 测。 : virB4 2 496 bp ， pG- 结果表明 克隆的基因包含了 完整编码区的 核苷酸序列 成功地构建了包含 BKT7 － virB4 诱饵质粒的酿酒酵母菌Y187 表达菌。 Construction of the Saccharomy ces cerevisiae expression vector containing virB4 gene GUO Qian1 ，CHEN Chuang － fu1 ，ZHANG Hui1 ，WANG Yong2 ，REN Yan1 (1． Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Disease ，College of Animal Science ＆Technology ，Shihezi University ， Shihezi 832000 ，China ;2 ． College of Life Sciences ，Shihezi University ，Shihezi 832003 ，China) Key words :RB51 ; secretion system ;virB4 ;Saccharomyces cerevisiae Y187