严重烫伤合并铜绿假单胞菌脓毒症家兔外周血淋巴细胞蛋白质组学的研究.pdfVIP

中国危11:病急救医学 2009 年 8 月第 211接第 8 期 Chin Crit Care Med.August 2009.Vol. 21.No. 8 • 455 • ·论辅· 严重烫伤合并铜绿假单胞菌服毒症家兔外周血 淋巴细胞蛋白质组学的研究 曾纪才在张二区红李莉捕任利成果鹏飞 黄晓龙 E摘要 目的 研究烫伤服毒症时外周血淋巴细胞蛋白质组的变化特点。方法 24 只雄性成年家兔被 随机分为对照组、烫伤组、烫伤版毒症 2h 和 6h 组，每组 6 只。采用 30%总体表面飘(TBSA) I 度烫伤模型， 12 烫伤后 24 h 经耳缘静脉注射铜绿假单胞菌悬液(ATCC 27853. 浓度 6X10 cfu/U1 ml/kg 制备烫伤隙毒疲 模型E 对照组用 37 c温水进行假烫伤。烫伤缎子伤后 24 h、烫伤腋毒症组于注射菌液后 2h 和 6h 取颈动脉血 分离淋巴细胞，裂解细胞，摄取总蛋白，用双向凝胶咆泳分离蛋白质，考马斯亮蓝染色，扫描、分析图像并筛选 整界蛋白质点(判断笼异的标准为平均表达量相攀超过3 倍，由本课题组设定)。应用基质辅助激光解吸/电离 飞行时间质谱分析方法得到肤质最指纹图谱，利用 Mascot 软件搜索数据库鉴定蛋白质。结果 对照组、烫伤 组、烫伤版毒症 2h 和 6h 组平均蛋白质点数分别为 1051土21 、 1026土30、 1078士36、 1065士31. 平均匹配率 分别为 91% 、 89% 、 92% 、 94% 。员伤除毒疲 2h 与 6h 级间各蛋白质点表达最无差异z 与对照组比较，烫伤组、 烫伤服毒疲 2h 和 6h 级共筛选出 19 个装异蛋白质点，得到鉴定的有 12 个，包括 11 种蛋白质，即 Cofilin、肤 院-脯氨酸顺反式界构酶胞榕质避自 A、程索、核背二二磷酸激酶、谷氨酸脱氢酶、砸结合蛋白 I 、 β肌动蛋白、 过氧化物氧化还原萦 6、膜联蛋白 1 、肌动蛋白-3 、细胞视黄酸结合蛋白.结论 严重烫伤并除毒按时外周血 淋巴细胞蛋白质组发生变化，表达改变并经鉴定的 11 种蛋白质功能涉及萤白质折叠、装配、运输、降解，以及 胞内信号传递、炎症、免疫、能量代谢、细胞增殖、分化、凋亡等，这些蛋白质与烧伤后服毒症的发生有关。 E关键诩】 兔F 烧伤， 服毒症s 铜绿假单胞菌F 淋巴细胞s 蛋白质组 Pr响eomic study of peripheral blood Iymphocytes of rabbits with severe burn and Pseudomon8S aeruginosa sepsis ZENG Ji-zhang , ZHANG Pi-hang. LI Li喃li ， REN μ-cheng. LIANG Peng-/ei , 1托JANG Xiao-yuan. De.ρartment 0/ Plastic Surgery and Burns. Xìangya Hospital. Central South University. Changsha 410008, Hunan. China (Abstr血ct] Objective To study the effect of severe burn and Pseudomonas aeruginosa sepsis on the proteomics of lymphocytes (LCs) of rabbits. Methods Twenty巾four rabbits were divided into four groups , i. e. control , severe scald , severe scald and 2啕hour sepsis , severe scald and 6-hour sepsis (6 rabbits in e