单抗的靶向超声造影剂制备及体外评价价.PDF

·1308 · doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2013.09.11 J South Med Univ, 2013, 33(9): 1308-1311 基础研究 血管血管内皮生长因子受体内皮生长因子受体22 单抗的靶向超声造影剂制备及体外评单抗的靶向超声造影剂制备及体外评价价 1 1 2 3 1 刘红梅 ，韩小华 ，杨莉 ，纪丽景 ，李素淑 1 2 3 南方医科大学第三附属医院超声医学科，广东 广州 510630 ；南方医科大学南方医院 药剂科，超声科，广东 广州 510515 摘要：目的探讨携血管内皮生长因子受体2（KDR）单抗的靶向脂质微泡的制备方法，并对其物理特性、生物活性、靶向黏附稳定 性进行体外测定。方法 采用声振仪制备生物素化脂质微泡（MB-B），再应用生物素-亲和素桥连技术构建携KDR 单抗的靶向 微泡（MB-BAB-KDR）。荧光显微镜下观察MB-B、单纯单抗微泡（MB-B-KDR）、MB-BAB-KDR 与荧光二抗孵育后荧光强度。 利用平行板流动腔技术体外模拟生理血流剪切力条件，评价靶向微泡的黏附效能。结果 制备的靶向微泡MB-BAB-KDR 呈圆 球形，粒度分布均匀。与荧光二抗孵育后，MB-BAB-KDR 发出明亮的绿色荧光（Ⅱ级），而MB-B-KDR 显示微弱的绿色荧光（Ⅰ 级）、MB-B 无荧光（0 级）。体外黏附实验显示，MB-BAB-KDR 结合数目随着小鼠KDR Fc 包被浓度的增高而增加（P0.05），相 同浓度下，随着时间的增加，MB-BAB-KDR 结合数目增加。结论 成功构建生物素- 亲和素桥连的靶向脂质体微泡 MB-BAB-KDR ，体外黏附实验显示MB-BAB-KDR 具有黏附稳定性，且与时间、浓度呈正相关。 关键词：靶向超声造影剂；血管内皮生长因子受体2 ；平行板流动腔；子宫内膜容受性；黏附 Detection of binding capability of targeted KDR ultrasound contrast agent in vitro for evaluating endometrial receptivity 1 1 2 3 1 LIU Hongmei , HAN Xiaohua , YANG Li , JI Lijing , LI Sushu 1Department of Ultrasound, Third Affiliated Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510630, China; 2Department of Pharmacy, 3Department of Ultrasound, Nanfang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China Abstract: Objective To prepare a new targeted liposome ultrasonic contrast agent with anti-KDR antibody that binds specifically with KDR as the main receptor of VEGF and evaluate its physical characteristics, biological activity and specific binding capability in vitro. Methods A sonicator was used to prepare the biotinylated lipid micro-bubbles (MB-B), and biotin-avidin-mediated technique was used for attachment of anti-mouse KDR monoclonal antibody to the micr