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广东省珠海市金海岸中学2014届高考生物一轮复习 基因工程课件
目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化。 步骤三:目的基因导入受体细胞 什么叫显微注射技术? 用口径为1μm的DNA注射器,将大量的目的基因片段注入到受精卵的核内,然后把经过注射的受精卵移植到另一只雌性动物的子宫内,使受精卵发育为转基因动物。 * 3.将目的基因导入微生物细胞 大肠杆菌细胞最常用的转化方法是: 首先用Ca2+ 处理细胞,以增大细菌细胞壁的通透性,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,这种细胞称为感受态细胞. 第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程. 1.将目的基因导入植物细—农杆菌转化法 2.将目的基因导入动物细胞--显微注射法 * 1)将细菌用CaCl2处理,以增大细菌细胞壁的通透性。 2)使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。 3)目的基因在受体细胞内,随其繁殖而复制,由于细菌繁殖的速度非常快,在很短的时间内就能获得大量的目的基因。 基因探针: 基因探针就是一段与目的基因或DNA互补的特异核苷酸序列。它包括整个基因,或基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。 * 步骤四:目的基因的检测与鉴定 四环素 抗性基因 氨苄青霉 素抗性基因 * DNA分子杂交原理: DNA分子杂交是基因诊断最基本的方法之一。其基本原理是:互补的DNA单链能够在一定条件下结合成双链,即能够进行杂交。这种结合是特异的,即严格按照碱基互补配对进行。因此,当用一段已知基因的核苷酸序列作为探针,与被测基因进行接触,若两者的碱基完全配对成双链,则表明被测基因中含有已知的基因序列。 * 1检测转基因生物染色体的DNA上是否插入目的基因-分子水平检测 2检测目的基因是否转录出了mRNA-分子水平检测 3检测目的基因是否翻译成蛋白质--个体生物学水平的鉴定 如一个抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞后,是否赋予抗虫或抗病特性,需要做抗虫或抗病的接种实验,以确定是否具有抗性以及抗性的程度。 * 多细胞生物的检测,将每个受体细胞单独培养并诱导发育成完整个体,检测这些个体是否摄入目的基因,摄入的基因是否表达(是否表现出相应的性状)。淘汰无变化的个体,保留有相应变化的个体进一步培养、研究。 例:用棉铃饲喂棉铃虫,如虫吃后不出现中毒症状,说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡,则说明摄入了抗虫基因并得到表达。 * * . 基因工程在农业上的应用: 1)高产、稳产和具优良品质的品种 用基因工程的方法可以改善粮食作物的蛋白质含量。 2)抗逆性品种 将细菌的抗虫、抗病毒、抗除草剂、抗盐碱、抗干旱、抗高温等抗性基因转移到作物体内,将从根本上改变作物的特性。如转基因抗虫棉。 * 二、动物基因工程前景广阔 1.用于提高动物生长速度 2.用于改善畜产品的品质 3.用转基因的动物生产药物 4.用转基因的动物作器官移植的供体 5.基因工程药品异军突起 * 转基因动物的乳腺。 就基因药物而言,最理想的表达场所是哪里? 是指把人或哺乳动物的某种基因导入到哺乳动物(如鼠、兔、羊和猪)的受精卵里,目的基因若与受精卵染色体DNA整合,细胞分裂时,该基因随染色体的倍增而倍增,使每个细胞中都带有目的基因,使性状得以表达,并稳定地遗传给后代,从而获得基因产品。这样一种新的个体,称为转基因动物。 什么叫转基因动物? * 1)乳腺是一个外分泌器官,乳汁不进入体内循环,不会影响转基因动物本身的生理代谢反应。 2)从乳汁中获取目的基因产物,产量高,易提纯,表达的蛋白质已经过充分的修饰加工,具有稳定的生物活性。 3)从乳汁中源源不断获得目的基因的产物的同时,转基因动物又可无限繁殖。 为什么乳腺能成为基因药物最理想的表达场所呢? * 在传统的药品生产中,某些药品如胰岛素、干扰素直接生物体的哪些结构中提取? 药品直接从生物的组织、细胞或血液中提取。 传统生产方法的缺点 由于受原料来源的限制,价格十分昂贵。 可利用什么方法来解决上述问题? 利用基因工程方法制造“工程菌”,可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。 * 胰岛素是治疗糖尿病的特效药。一般临床上使用的胰岛素主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取,用该方法生产的胰岛素产量低,价格昂贵,远不能满足社会需要。1979年,科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组,并在大肠杆菌内实现了表达。1982年,美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场,售价降低了30%~50%。 基因工程药品
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