广东省4种花卉青枯病的病原鉴定.pdfVIP

第 28 卷第3 期 Vol. 28 No.3 华中农业大学学报 2009 年 6 月 Jou口1al of Huazhong Agrícultural UlÚversity June 2009.277 - 280 广东省 4 种花卉青枯病的病原鉴定* 刘琼光1) 曾伟达2) 郑向华1.3) 陈泽鹏4) (1)华南农业大学资源环境学院，广州 510640 卢}广州市花卉研究中心，广州 510360; 3) 广东省江门市农业局，江门 529000; 4) 广东省烟草公司，广州 510640) 摘要 采用传统和分子生物学方法，对广东省发生的美人蕉、姜花、黄德和百日草 4 种花卉青枯病的病原进 行了鉴定。通过病菌形态观察、染色试验、生理生化性状测定以及细菌 16S rDNA序列分析，结果表明 4 种花卉 青枯病病原为茄科劳尔氏菌Ralstonia solanacearum. 这4 种花卉的青柏病均为国内首次报道，且这4 种花卉均 为茄科劳尔氏菌R. solanacearu侧的新寄主. 关键词 美人蕉;姜花;黄穗z 百日草;茄科劳尔氏菌 中固法分类号 S 432. 4+2 文献标识码 A 文章编号 1000-2421 (2009)03-0277-04 植物细菌性青枯病(Ralstonia solanacearum) 种各自寄主。每株接种菌液 50 mL.浓度 1 X 108 cfu/mL. 以清水淋根为对照。处理后定期观察寄主 是普遍发生的世界性重要士传病害。该病菌寄主范 围广泛，可侵染多种植物[1] 。美人蕉(Canna gene- 发病症状。 ralis) 是多年生宿根草本花卉，极具观赏价值，其根 1.3 病原鉴定 茎及花还可人药。姜花(Hedychiumcoronarium) 1) 细菌染色试验。革兰氏染色按结晶紫、番红 是多年生草本植物，除观赏之外，也有药用功能。黄 染色法进行[2] 鞭毛染色按银盐染色法进行[2] 。 穗(Solidago cannnnnadensis) 是菊科一枝黄花属植 2) 细菌生理生化鉴定。细菌的生理特性及生化 物，也是常见的夏季盆栽草花。百日草Zinnia ele- 型测定参照 Schaad 等的方法进行LUO gans) 又名百日菊，是菊科百日草属植物，也是普遍 3) 细菌 16S rDNA 序列测定。细菌模板 DNA 栽培的草花。近年在广州、深圳等珠江兰角洲地区， 提取按常规方法进行。采用细菌的 16S rRNA 通用 发现美人蕉、姜花、百日草和黄穗等花卉枯萎租死引物 PCR 扩增细菌 16S rDNA，其引物序列为 27F: 亡，发病植株青枯萎焉，微管束变黑，并有细菌被溢 5 -AGAGTTTGATCCTGGCTCAG -3; 1 492R: 出，巳严重影响其产量和品质。笔者对 4 种花卉的 5- GGTTACCTTGTTACGACTT- 3[4J 0 PCR 反 病原进行了分离和鉴定，旨在为病害防治和花卉进应体系(50μL) :10XPCR 缓冲液 5μL， MgC1 (20 2 出口检验检疫提供科学依据。 mmol/L) 5μL， dNTPsC10 mmo l/L) 1μL，引物 27F (5 pmol/L)和引物 1 492R(5 pmol/L)各1μL，模板 1 材料与方法 DNA( 约 100 ng/μL)1μL， Taq DNA 聚合酶