编码日本血吸虫抱雌沟蛋白及肌动蛋白的基因性别间的表达差异性.pdfVIP

动物学报 　48 (2) :240～244 , 2002 A cta Zoologica S inica 　　　　　 　 编码日本血吸虫抱雌沟蛋白及肌动蛋白的 基因性别间的表达差异性 朱建国 ①, ②　林矫矫 ①　杨冠珍 ②　倪振亚 ①　陈兆国 ① ② ② ① 吴祥甫 　周元聪 　蔡幼民 ( ①中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所 , 农业部动物寄生虫学重点开放实验 , 上海 200232) ( ②中国科学院上海生物化学研究所 , 上海 200031) 摘 　要 　研究了所克隆的日本血吸虫两个基因的性别间的表达差异性。分别将所克隆到的编码日本血吸虫抱雌 沟蛋白的 cDNA ( Sj GCP1 ) 和肌动蛋白的 cDNA ( SjAct ) 制成 DNA 探针 , 利用 Southern blotting , Northern blotting 和斑点印迹法对其相应基因性别间的表达差异性进行了研究。结果显示 , 日本血吸虫抱雌沟蛋白的基因 在雄虫中转录而雌虫中不转录 , 血吸虫肌动蛋白基因在雄虫中转录量高于雌虫 , 表现出转录量的差异。证明这两 个基因转录具有性别间的表达差异性。 关键词 　日本血吸虫 　抱雌沟蛋白 　肌动蛋白 　基因 　性别间的表达差异性 　　从研究血吸虫性别差异性基因入手探索其发 公司产品 , Trizol kit , 尼龙膜购自生工生物工程公 育、性成熟及生殖机制是防治血吸虫病研究的重点 司。 (Basch , 1981) 。国内外已经克隆到一些血吸虫性 13 　基因的克隆及测序 别差异性基因 , 并对其在血吸虫防治方面的功能进 见 ( Zhu , 2000) 。 行了一定研究 , 显示了良好的前景 ( 朱建国 , 14 　血吸虫基因组 D NA 的提取及酶切 2000) 。本研究利用 Southern blotting 和 Northern 精确称取液氮冻存的雌雄分开血吸虫各 200 blotting 等对我们首次所克隆的编码日本血吸虫肌 mg , 玻璃匀浆器研磨 , 按文献 ( 萨姆布鲁克 等 动蛋白 ( Zhu , 2000) 和日本血吸虫抱雌沟蛋白保 著 , 金冬雁等译 , 1993) 中大分子量 DNA 的提取 守区两个 cDNA 的相应基因的性别差异性分别进行 方法 , 分别提取雌雄虫基因组 DNA , 琼脂糖电泳 研究。 证明 DNA 提取物纯度及完整性好。为保证 DNA 中的目的片段不被切断 , 选择 Hind Ⅲ和 Xho Ⅰ, 1 　材料和方法 对基因组 DNA 进行酶切 , 酶切反应体系为 100 μ l , 11 　日本血吸虫中国大陆株成虫及尾蚴 用紫外分光光度计测定酶切产物 DNA 含量。 尾蚴系中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究 15 　血吸虫总 RNA 的提取 所钉螺室在感染性钉螺维持的日本血吸虫中国大陆 精确称取液氮冻存的雌雄分开血吸虫各 200 株安徽品系尾蚴 , 成虫则由尾蚴感染新西兰大白 mg , 按 T