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叶片荧光测量实验报告 实验目的 实验方法 利用PAM100,荧光成像系统测量叶绿素荧光 实验原理及一些参数的意义 荧光的变化反映光合与热耗散的变化。 光化学淬灭（Photochemical Quenching）:由于光合作用引起的荧光下降，反映了光合活性的高低。 qP=(Fm’-Fs)/Fv’=1-(Fs-Fo’)/(Fm’-Fo’) （基于“沼泽模型”） qL=(Fm’-F)/(Fm’-Fo’)·Fo’/F=qP·Fo’/F （基于“湖泊模型”） 非光化学淬灭（Non-Photochemical Quenching）:由于热耗散引起的荧光下降 。 qN=(Fv-Fv’)/Fv=1-(Fm’-Fo’)/(Fm-Fo) NPQ=(Fm-Fm’)/Fm’=Fm/Fm’-1 ，不需测定Fo’，适合野外调查 qN或NPQ反映了植物耗散过剩光能转化为热的能力，反映了植物的光保护能力。 Fv/Fm =(Fm-Fo)/Fm : PS II的最大量子效率，反映植物潜在最大光合能力，高等植物一般在0.8－0.84之间，当植物受到胁迫（Stress）时，Fv/Fm显著下降。 ΦPS II = Yield = (Fm’-Fs)/Fm’ = ΔF/Fm’ = qP·Fv’/Fm’: 任一光照状态下PS II的实际量子产量（实际光合能力、实际光合效率）不需暗适应，不需测定Fo’，适合野外调查。 Y(NPQ)=1-Y(II)-1/(NPQ+1+qL(Fm/Fo-1))：调节性能量耗散，PS II处调节性能量耗散的量子产量。若Y(NPQ)较高，一方面表明植物接受的光强过剩，另一方面则说明植物仍可以通过调节（如将过剩光能耗散为热）来保护自身。Y（NPQ）是光保护的重要指标。 Y(NO)=1/(NPQ+1+qL(Fm/Fo-1))：非调节性能量耗散 PS II处非调节性能量耗散的量子产量。若Y(NO)较高，则表明光化学能量转换和保护性的调节机制（如热耗散）不足以将植物吸收的光能完全消耗掉。也就是说，入射光强超过了植物能接受的程度。这时，植物可能已经受到损伤，或者（尽管还未受到损伤）继续照光的话植物将要受到损伤。Y（NO）是光损伤的重要指标。 P：光合速率，即相对电子传递速率rETR Pm: 最大光合速率，即最大相对电子传递速率rETRmax (：初始斜率，反映了光能的利用效率 (：光抑制参数 Ik=Pm/( ：半饱和光强，反映了样品对强光的耐受能力。 AL:作用光 ML:检测光 SP/P+Fsp:饱和脉冲光 注：光化学淬灭可以被一种短饱和脉冲光（0.2－1 s）暂时完全抑制，剩余的荧光淬灭就是非光化学淬灭。（叶绿素a荧光理论及其应用 张西斌） 实验步骤 4.1 Dual-Pam100的操作步骤 4.1.1 参数调整 4.1.1.1 打开Dual-Pam100的界面，更改下面参数： Mode:fluo+P700; Means light:fiuo-int=10 P700-int=5 Act light: Act.red.right-int=17 Far red light=5 Width=40s Sat pulse: P+F+sp--int=10; 4.1.1.2点Light，进入界面，再点edit进行下面参数的编辑： Intense 1，4,8,12,14,16,18,19,20 Time 2,2,2,2,2,2,2,2,2,之后的全部设置为0； 进入测定界面开始测定 回到slow kinetics界面 点击F0，Fm(确定Y（II）值0.8-0.85之间)→点Bal(平衡光系统I，II)→点Pmstart(过4s后)→点Al作用光（过3min半）→点P+F+sp饱和光（此时一般会观察到红色曲线达到平衡）→过30s左右关掉Al(曲线会下降)→再过1min左右（曲线平稳）→点stop→在当前界面点击曲线保存按钮保存曲线。 4.1.2.2 回到light curve 界面 点Bal→点start（出现对话框 new F0,Fm and Pm-determindtion…点NOreport保存数据→数据保存后手动清空当前界面数据。 4.2荧光成像系统的操作 先打开荧光成像仪再打开电脑对应系统→将叶片按要求放在叶室； 4.2.1 进入setting界面 如下调整参数： Meas.Light-int=1 Frequence=1; Act.light-int=19 widths=0; Image Correction=MAXI; Image Transformation=Rotate 180° Batt