2012级 多巴胺代谢通路成分的衍生化HPLC荧光检测方法的研究.docVIP

本科生毕业论文（设计） 题　　目 多巴胺代谢通路成分的衍生化HPLC荧光检测方法的研究 姓　　名 贾士城 学号 2010412808 院　　系 化学与化工学院 专　　业 化学工程与工艺 指导教师 赵先恩 职称 副教授 2014年5月15日 曲阜师范大学教务处制 目 录 摘要 1 关键词 1 Abstract 1 Key words 1 引言 2 1.实验部分 4 1.1 仪器与试剂 4 1.2 标准溶液的配制 1.3 衍生过程 1.4 色谱条件 2.结果与讨论 2.1 衍生产物激发波长和发射波长的选择 2.2 衍生条件的优化 2.3 灵敏度的讨论 5 2.3.1 RB-SE的直接荧光检测..........................................................................5 2.3.2 RB-SE标记检测分子产物荧光检测（HPLC-FLD）...........................6 2.3.3 实际样品中被检测物质的分离与分析..................................................6 2.4 精密度讨论.........................................................................................................7 2.5 结论.................................................................................................................... 7 致谢 参考文献 表1 色谱柱梯度洗脱条件 表2 衍生产物标准曲线分析.......................................................................................7 图衍生反应方程式 .............................................................4 图 6 图 6 多巴胺代谢通路成分的衍生化HPLC荧光检测分析方法的研究 化学工程与工艺专业学生 贾士城 指导教师 赵先恩 摘要：本实验是利用琥珀亚酰胺与DCC作用生成罗丹明酯RB-SE，RB-SE在pH=8.00的硼酸-硼砂缓冲溶液中、50℃条件下与被检测分子反应5 min可获得稳定的衍生物。比较直接荧光检测与RB-SE对单胺类和神经递质类分子标记衍生法，发现后者检测灵敏度提高。检测范围拓宽，其检出限在0.265-0.374nmol之间。然后对其精密度进行考察，测试条件为：在激发波长566nm、发射波长594nm处对衍生产物进行液相色谱荧光检测。目标检测分子的衍生产物在2×10-7mol/L~1.7×10-5mol/L范围内，呈现良好的线性关系。此方法方便快捷、选择性好、灵敏度高、准确性强。 关键词：高效液相色谱法 荧光检测器 罗丹明酯(RB-SE) 衍生化 High Performance Liquid Chromatography fluorescence detection of dopamine metabolic pathway components Chemical Engineering and Technology miaomiao Zheng Tutor Xian-en ZHAO Abstract: A novel labeling reagent generated in the DCC condensation of Luo Danming easter RB-SE was used for the analysis of dopamine synthesis path component and a highly sensitive method for the determination of molecular detection of targets using RB-SE as enhancing reagent detection has been