肠出血性大肠杆菌O157：H7抗原基因及毒力基因多重荧光定量PCR检测方法的建立.pdfVIP

2016 48 10 ·13 · 畜牧与兽医 年 第 卷 第 期 ， ， ， ． O157 :H7 PCＲ ［J］． ，20 16 ，48 夏灿 蒋蔚 刘迎春 等 肠出血性大肠杆菌 抗原基因及毒力基因多重荧光定量 检测方法的建立 畜牧与兽医 (10):13 － 21 Xia C ，Jiang W ，Liu Y C ，et al． Establishment of multiplex real － time FQ PCＲ for detection of antigen and virulence genes of enterohemorrhagic Escherichia coli O157 :H7 ［J］． Animal Husbandry ＆ Veterinary Medicine ，20 16 ，48 (10):13 － 21 肠出血性大肠杆菌 O157 :H7 抗原基因及毒力基因 多重荧光定量PCＲ 检测方法的建立 1，2 2 2 2 2 ， ， ， ， ， 夏灿 蒋蔚 刘迎春 陈永军 龙梦瑶 1，2 2 * 1* ， ， 薛俊欣 王权 孙卫东 (1. ， 210095 ;2. ， 20024 1) 南京农业大学动物医学院 江苏南京 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 摘要:根据GenBank 公布的大肠杆菌O157 :H7 的菌体抗原基因rf bE 、鞭毛抗原基因f liC、溶血素基因hlyA 、紧密黏附素基因eaeA 和志贺样毒素 stx 1 stx2 ， 6 Taqman ，rfbE / eaeA 、Stx1/ hlyA 、fliC / Stx2 5 基因 和 的序列 同源性比较后选择保守序列分别设计 对特异性的引物及相应的 探针 探针 FAM 、HEX 、CY5 ，3 BHQ1 。 ， 2 、 端分别标记为 荧光报告基团 端均标记为 荧光淬灭基团 通过优化反应体系和程序 建立 个能够快速 特异性地检 O157 :H7 4