BVDV荧光RT_PCR检测方法的建立及应用.pdfVIP

广东农业科学 年第 期 154 2011 11 BVDV 荧光RT- PCR 检测方法的建立及应用 1 姚晓辉 ， 李华强， 陈瑞爱， 练炳洲， 王林川， 邓月嫦， 王凤国 （广东大华农动物保健品股份有限公司，广东新兴 527400 ） 摘 要： 根据 中登录的牛病毒性腹泻病毒 （ ） 毒株序列， 选择 ’ 保守区域设计 对特异性引物和 条 GenBank BVDV 5 NTR 1 1 Taqman 探针，通过矩阵法筛选引物探针的最佳浓度，建立了检测BVDV 的荧光RT-PCR 方法。 结果显示，用 1.5 μL 上下游引物混 合液（ ）和 探针溶液（ ）对 进行检测，可获得较小 值、较高吸光值，并可降低检测成本。对该方法 10 μmol/L 0.5 μL 10 μmol/L BVDV Ct 进行特异性、敏感性和重复性试验，结果表明，该方法敏感性高、特异性强、重复性好。 将该方法应用在疫苗生产中，可快速准确地 筛选出合格的原辅材料和半成品，为生产提供及时准确可靠的数据。 关键词： ； 荧光 ； 检测方法 BVDV RT-PCR 中图分类号： ； 文献标识码： 文章编号： （ ） Q789 S858.23 A 1004-874X 2011 11-0154-04 Establishment and application the fluorescence RT-PCR detection method of BVDV YAO Xiao-hui, LI Hua-qiang, CHEN Rui-ai, LIAN Bing-zhou, WANG Lin-chuan, DENG Yue-chang, WANG Feng-guo (Guangdong Dahuanong Animal Health Products CO., Ltd, Xinxing 527400, China) Abstract: A pair of primers and a Taqman probe were designed based on the gene sequences of BVDV available in GenBank. The studies established the fluorescence RT -PCR detection methods of BVDV by screening the optimal concentration of the primers and