植物细胞工程2014.pptVIP

植物组织培养 外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官 1）外植体灭菌消毒（根尖、茎、芽、嫩叶、种子、花粉等） 2）用消毒过的器械将外植体置于培养皿上 3）切取所需的外植体 4）将外植体接种于培养容器的培养基上 整个试验在超净工作台上进行，保持无菌！ 外植体经过一段时间在培养基上生长后，会形成愈伤组织 植物组织培养的培养基 定义：含有一定营养成分，供组织培养植物生长的基质 无机营养成分：C，H，O大量元素及部分微量元素 有机营养成分 ① 含N物质：包括维生素和氨基酸 ② 碳源：2%—5%的蔗糖(供能和调节渗透压) ③ 琼脂：起支持作用 ④ 相关激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素 PH值：5.0－6.0 几个概念： 愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 * 细胞工程 指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 细胞工程 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞整体水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念 分类 植物细胞工程 动物细胞工程 理论基础 细胞的全能性 理论基础 细胞增殖 主要技术 植物细胞工程技术 动物细胞工程技术 植物体细胞杂交 植物组织培养 单克隆抗体技术 动物细胞融合 动物细胞培养 核移植 胚胎移植 异种植物细胞 杂种细胞 杂种植株 异种动物细胞 动物细胞群 重组细胞 体细胞细胞核 早期胚胎 受精卵 去核卵细胞 克隆动物 试管婴儿 动物细胞融合 植物体细胞杂交 植物组织培养 动物细胞培养 核移植 胚胎移植 体外受精 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 （一） 细胞的全能性 1、定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。 2、原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 3、差异： （1） 受精卵的全能性最高 （2） 受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。 植物细胞的全能性 细胞分化程度与细胞分裂能力呈负相关 4、大小 ①受精卵＞胚胎干细胞＞生殖细胞＞体细胞 ②植物细胞＞动物细胞 例一：非洲爪蟾实验 突变型蝌蚪肠上皮细胞 野生型未受精卵细胞 紫外线破坏细胞核 取出细胞核 无核的未受精卵 （含有一个核仁） “重组细胞” 囊胚 囊胚 蝌蚪 成蛙（细胞核含一个核仁） 移入 发育 发育 发育 已经分化的动物细胞可以发育成为一个动物体 5.细胞表现出全能性的条件 离体状态 有一定营养物质、激素和其他外界条件 蜜蜂（2N=32） 减数分裂 卵细胞(N=16) 发育 雄蜂(N=16) 卵细胞可以直接发育成为一个新个体 例二： 思考讨论：为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ 基因在特定空间和时间条件下选择性表达的结果。在个体发育的不同时期，生物体不同部位的细胞表达的基因是不同的，合成的蛋白质也不一样，从而形成了不同的组织和器官。 植物组织培养 关键词： 外植体、脱分化、再分化、愈伤组织 细胞离体、一定的营养物质、激素和其他外界条件 必要条件： 试管苗大规模培养 过程 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织（异养需氧） 根、芽 植物体 外植体 脱分化 植物激素： 细胞分裂素、生长素 再分化 植物组织培养 植物组织培养条件： 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、