32动物细胞培养的基本方法.pptxVIP

第五节 动物细胞培养的基本方法;2 消化分离法;二 细胞计数;三 细胞传代;2 贴壁细胞的传代;已培养过的瓶子可再次使用，但一般不要超过2～3次。 2倍体细胞培养时每次传代必须写上传代次数。 分种数量取决于细胞数和细胞特性，多数细胞分种以20～30万个/ml,每次1传2或1传3。 传代后一般每天或隔一天换液，每3～5天就要传代一次。;四 细胞的冻存和复苏;2 细胞的复苏;第六节 动物细胞大量培养的方法和操作方式; 动物细胞大规模培养： 在人工条件下（设定pH、温度、溶氧等），在细胞生物反应器（bioreactor）中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。目前可大规模培养的动物细胞有鸡胚、猪肾、猴肾、地鼠肾等多种原代细胞及人二倍体细胞、cho（中华仓鼠卵巢）细胞、BHK-21(仓鼠肾细胞)、Vero细胞(非洲绿猴肾传代细胞，贴壁依赖)等。; 已成功生产了包括狂犬病疫苗、口蹄疫疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、红细胞生成素、单克隆抗体等产品。 ;依细胞种类：原代培养、传代培养 依培养基：液体培养、固体培养 依培养器和方式: 静止培养、旋转培养、搅拌培养、微载体培养、中空纤维培养、固定床或流化床培养。 生产实际来看：悬浮培养、贴壁培养和贴壁-悬浮培养。 ;一、动物细胞大规模培养的方法;缺点：细胞体积小，且处于悬浮状态，难采用灌流培养，细胞密度低。;2