粘膜疫苗：前景及挑战.docx

粘膜免疫：前景和挑战摘要：大多数感染性病原在粘膜表面进入机体，因此粘膜免疫应答起到第一道防线的作用。粘膜免疫诱导保护性粘膜免疫应答的最有效途径是通过口腔、鼻腔、直肠和阴道，但是目前应用的绝大部分疫苗都是通过注射方式。正如本文所讨论的，最近的研究为粘膜组织功能和作用于粘膜表面构成免疫保护的先天免疫和适应性免疫应答的相互作用的研究提供了新的角度。这些进展被寄望于加速防治包括HIV/AIDS在内的一些人类疾病的新型的粘膜疫苗的开发与实验。粘膜表面具有巨大容易被病原微生物感染的表面积。适应性免疫应答旨在辨别通过粘膜表面进入机体的与通过注射或损伤被直接引入组织或血流的抗原、病原和疫苗。局部粘膜免疫应答对保护机体抵抗疾病的重要性正逐渐变得清楚。例如，针对霍乱弧菌和霍乱毒素的粘膜抗体与霍乱的防治相关。鉴于注射性疫苗通常由到粘膜免疫的能力较弱并且对抵抗粘膜表面感染的效率很低，粘膜免疫应答的最有效途径是通过粘膜表面免疫。然而，临床疫苗的研究主要基于注射性抗原，并且现在应用的大多数疫苗都是肌肉注射或皮下注射。这很容易理解，因为注射释放数量确定的抗原进入机体，产生可在血液样本中很容易检测的特异性抗体和淋巴细胞。相比之下，我们对粘膜免疫的了解和粘膜疫苗的开发远远落后，部分原因是由于粘膜疫苗的应用和粘膜免疫应答的检测更复杂。进入机体的粘膜疫苗的精确计量不能被准确检测，因为粘膜分泌物中的抗体很难获得和定量，粘膜T细胞的重获和功能检测工作量很大并且有技术上的限制。作为一个结果，在美国或者是其他地区仅有少数几种粘膜疫苗被批准用于人体试验。这些包括抵抗小儿骨髓灰质炎、伤寒沙门氏菌、霍乱弧菌和轮状病毒的口服疫苗以及抵抗流感病毒的鼻腔疫苗。但是，受到粘膜免疫系统新信息的刺激和粘膜传播病毒HIV的威胁，目前粘膜疫苗的研究和实验正在加速。本文中，我们提供一份导致保护性粘膜免疫应答的粘膜组织内活动综述，并探讨粘膜免疫疫苗设计的关键生物学和技术方面。然后，我们总结目前HIV的粘膜疫苗开发的进展。粘膜保护机理粘膜表面的先天防御机制呼吸道、胃肠道和泌尿生殖道的粘膜表面通过微妙的上皮屏障与外界隔离。例如在胃肠道，一种单层上皮细胞通过紧密连接连接在一起，面对富含微生物的复杂的腔道环境。上皮细胞及其相关的腺体（例如唾液腺）产生包括粘蛋白和抗菌肽在内的非特异性的先天防御。然而，外源蛋白和病原微生物经常破坏上皮屏障，并且粘膜组织是免疫活动的活跃部位。在肠道的粘膜，分散的淋巴结和抗原呈递细胞特别丰富；预计在肠道粘膜中拥有的抗体生成细胞比脾脏和淋巴结加在一起的还多。皮细胞积极参与粘膜防御。他们作为一种感受器，通过多样受体，如TLRs，识别有害的病原微生物。他们通过释放细胞因子和驱化因子到下层的粘膜细胞作出应答，例如树状突细胞（CDs）和巨噬细胞，激发先天非特异性防御并促进适应性免疫应答。在肠道中，那里含有大量的微生物，上皮细胞和上皮间淋巴细胞以及皮下吞噬细胞共同作用，调节和抑制有些信号，以防止对无害的营养物质和正常的肠道微生物产生不希望的应答，其可导致粘膜发炎。因此粘膜组保持警戒的恒定状态，而且他们适应提取外源微生物及其产物。作为一个结果，那些通过注射到无菌环境（例如肌肉）产生有效免疫应答的疫苗当进行粘膜时很可能不被识别，因为那里的组织长期暴露在微生物之下。粘膜表面的特异性免疫保护粘膜病原通过多种手段感染人体。一些病原体，例如霍乱弧菌和致病性大肠杆菌，通过入侵上皮表面引起疾病。冠状病毒和流感病毒等病原可感染上皮细胞，然而一些其他病原体如弗氏志贺菌、鼠伤寒可在粘膜固有层建立局部感染。包含HIV和沙门氏菌的某些病原体利用肠道粘膜作为全身性感染传播的准备阶段（图1）。图1.粘膜表面免疫保护机理。多种免疫效应机理作用于粘膜表面的保护。抗原特异性的B细胞核T细胞识别粘膜组织小静脉内皮细胞并进入粘膜。粘膜B细胞最终分化成粘膜浆细胞，其产生的大多数二聚体IgA以分泌型IgA形式进入分泌物，拦截抗原和病原体，防止粘膜受到侵袭。中和性的IgG也存在于粘膜组织;粘膜IgG也许是来自局部浆细胞或血液，由局部有孔的毛细血管扩散而来。感染的细胞可能被特异性的CTLs或者ADCC杀死。抗原还可以被树状突细胞或吞噬细胞捕获，携带到下游淋巴结。粘膜特异性免疫应答的一个重要特征是局部生成和分泌二聚或多聚的IgA抗体。与其他抗体类型不同，IgA在富含蛋白酶的粘膜表面外部环境中可以抵抗降解。在人体内，产生的IgA比其他所有类型的免疫球蛋白的总和还多，高浓度的IgA抗体（超过1mg/ml）存在于正常人体粘膜表面相关分泌物中。分泌性IgA（sIgA）的蛋白酶抗性是其二聚体形式和在粘膜浆细胞合成时高度糖基化的结果。并且其与来自上皮多聚免疫球蛋白受体（pIgR）的一段糖基化片段相关，该受体可介导二聚体IgA通过上皮细胞转运到腔道。sI