黄颡鱼源柱状黄杆菌的分离鉴定及其对翘嘴鳜的致病性.pdfVIP

第35卷 第 2期 华 中 农 业 大 学 学 报 Vol_35 No．2 2016年 3月 JournalofHuazhongAgriculturalUniversity Mar．2016，83～89 黄颡鱼源柱状黄杆菌的分离鉴定 及其对翘嘴鳜的致病性 张玉蕾 赵丽娟 周伟东。 艾桃 山。 林 蠡 1．华中农业大学水产学院，武汉430070；2．山东省淡水渔业研究院，济南 250013； 3．武汉市水产科学研究所，武汉430207 摘要 从患病黄颡鱼上分离出1株柱状黄杆菌 (Pf1)，对其进行分类鉴定和药物敏感试验。用 Pfl感染黄 颡鱼和翘嘴鳜，发现 Pfl对2种鱼均有致病性。Pfl可导致翘嘴鳜多个组织细胞坏死和炎症反应，严重损伤肝、 体肾和鳃。被感染翘嘴鳜肝细胞肿胀、空泡化坏死；肾小管广泛坏死和大量炎症细胞浸润；鳃小片毛细血管充 血，呼吸上皮细胞肿胀变性 ，鳃的呼吸功能衰退。鳃部病变导致感染鳜呼吸频率加快 、游动缓慢，最后大量死亡。 关键词 柱状黄杆菌；黄颡鱼；翘嘴鳜 ；致病性 ；组织病理 中图分类号 S917．1 文献标识码 A 文章编号 1000—2421(2016)02—0083—07 柱状黄杆菌 (Flavobacteriumcolumnare)属于 生化特性、系统进化 以及药物敏感性试验及致病性 黄杆菌 目、黄杆菌科、黄杆菌属，是柱形病的病原 研究。由于柱状黄杆菌引起的柱形病宿主广泛，症 体l】]，其学名几经更改，曾用名包括柱状芽孢杆菌 状相似 ，本研究利用分离的病原菌感染另一种宿主 (Bacilluscolumnaris)l3]、柱形粒球粘细菌 (Chon— 翘嘴鳜，通过观察其致死率和组织病理切片，反映该 drococcuscolumnaris)l4]、柱状噬纤维菌 (Cytopha— 病原的毒力与致病性，旨在为开展柱形病 的防治提 gacolumnaris)[5]和柱状 曲桡杆菌(FlexibacterCO— 供重要参考 。 lumnaris)_6等 。它是一种广泛分布的重要水生致 1 材料与方法 病菌，能够引发多种经济鱼类烂鳃、体表溃疡、出血， 并导致高死亡率，已分离鉴定出该病原的鱼类包括 1．1 试验材料 翘嘴鳜l7]、斑点叉尾鲴E、草鱼E。]等。其感染力强、 黄颡鱼病鱼材料取 自华中农业大学水产学院养 发病迅速，导致药物治疗收效甚微，加之预防措施薄 殖基地(体长 15～18cm，体质量 1O～l8g)。人工 弱，每年给水产养殖业造成巨大的经济损失[IO-l1]。 感染用的黄颡鱼来 自该养殖基地提供的健康鱼。人 翘嘴鳜 (Sinipercachuatsi)是我 国特产的名贵 工感染的翘嘴鳜购于武汉市江夏区鲁湖渔场。 淡水鱼，已在多个省份开展了养殖_】。随着翘嘴鳜 柱状黄杆菌常规 Shieh培养基配方参照文献 的人工养殖规模扩大，疾病问题也越来越严重，烂鳃 [15]配制，柱状黄杆菌选择性培养基配方在 Shieh 病是严重危害翘嘴鳜养殖的疾病之一，常引起翘嘴 培养基基础上，加入 2~tg／mL托普霉素、20U／mI 鳜的大批量死亡，使得人工养殖风险加大E13-14]。陈 多粘菌素B。微生物生化管和药敏片由杭州微生物 昌福等E]应用细菌学方法对患病的翘嘴鳜病原菌进 试剂有限公司生产。 行了分离与鉴定，初步证明了柱状嗜纤维菌是翘嘴 1．2 病原菌的分离纯化 鳜烂鳃病的病原。 选取具有典型病症如烂尾、烂鳍、体表溃烂的濒 2014年 5月笔者所在实验室部分黄颡鱼养殖 死黄颡鱼，用接种环蘸取溃烂病灶部位于 Shieh平 水池暴发细菌性疾病，笔者从患病黄颡鱼上分离鉴 板上划线分离细菌。将平板倒置于 28℃生化培养 定得到一株柱状黄杆菌，并对其进行了形态学、生理 箱培养，1～2d后平板长出菌落，即挑选优势细菌 收稿 日期：2015-07—26 基金项 目：湖北省科技支撑计划项 目(2o15241)；高校 自主创新基金项 目(2013PYO69