脂肪酸的色谱保留时间规律及质谱特征研究.pdf

第35卷 分析化学 (FENXIHUAXUE)研究报告 第7期 2007年7月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 998，1003 脂肪酸的色谱保留时间规律与质谱特征研究 及其在食品分析中的应用 吴惠勤* 黄晓兰 林晓珊 黄芳 朱志鑫 马叶芬 (中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室，广州510070) 摘 要 用石油醚提取食品中的脂肪，经甲醋化反应后，采用HP-88(100mx0.25mm,0.33wm)弹性石英毛 细管柱分离脂肪酸甲酩的同系物及异构体，GC/MS法测定。研究了不同链长脂肪酸的同系物及异构体的气 相色谱出峰顺序，得到其保留时间规律;研究了不同脂肪酸的质谱断裂规律，选择3个特征离子来鉴定脂肪酸 成分。建立了3个特征离子确定脂肪酸碳数及双键数目，色谱保留时间规律确定脂肪酸顺反异构体及双键位 置异构体的方法。本法无需标准品即可快速测定脂肪酸同系物及异构体的含量，适用于脂肪酸组成的研究; 及油脂、食品中脂肪酸，特别是反式脂肪酸的测定。 关键词 脂肪酸，同系物，顺反异构体，保留时间规律，质谱特征离子，气相色谱/质谱，食品 1 引 言 脂肪酸是人体不可缺少的营养成分之一，与健康密切相关的多不饱和脂肪酸有防治心血管疾病的 作用。但研究表明，反式脂肪酸(trans-fattyacids,TFAS)却起反作用，它降低了人体中有益的高密度胆 固醇的含量，而使有害的低密度胆固醇含量增加，导致心脑血管疾病、动脉阻塞硬化、糖尿病、乳腺癌和 老年痴呆症，还可能影响儿童生长发育和神经系统健康’「〕。 丹麦、美国、巴西等国已相继出台对食品中反式脂肪酸的限量规定。然而，目前尚未出台反式脂肪 酸的检测标准，也没有理想的方法测定食品中的反式脂肪酸[210 脂肪酸的分析已有许多文献报道[3-61，但对脂肪酸顺反异构体的分析仅见有油酸及亚油酸的报 道t7,81，而且还需要昂贵的脂肪酸甲醋标准品进行定性。本研究采用气相色1普/质谱技术初步建立了食 品中反式脂肪酸的测定方法1[91，并在文献9〔〕基础上进一步研究了不同链长的脂肪酸同系物、顺反异构 体、双键数目及位置不同的异构体的气相色谱保留时间规律，研究了脂肪酸的质谱断裂规律，根据质谱 特征离子确定脂肪酸的组成，结合色谱保留时间规律鉴定脂肪酸同系物及各种异构体，建立了无需标样 可测定脂肪酸含量的新方法。本方法操作简便、快捷、准确、可靠，适用于脂肪酸组成的研究及油脂、食 品中反式脂肪酸含量的测定。 2 实验部分 2.1仪器及工作参数 2.2.1GC条件 色谱柱:HP-88(100mx0.25mm,0.2R,m)弹性石英毛细管柱，柱温17090，恒温 2min，以IOC/min程序升温至20000，保持32min。进样口温度2500C，载气He，柱前压265kPa，分流 比10:1，进样量0.5WLo 2.2.2MS条件 El离子源，电子能量70eV，质量扫描范围29一450u，四极杆温度15000，离子源温 度23090，电子倍增器电压2300V,GC/MS接口温度28090，标准质谱图库Wiley275.L,, 2.2.3分离与鉴定 酩交换反应得到的脂肪酸甲醋经气相色谱石英毛细管柱分离，质谱仪记录质谱 图，得到GC-MS总离子流图。根据质谱图及标准品的色谱保留时间确定各种脂肪酸异构体成分，并用 面积归一化法测定其相对含量。 2006-10-17收稿;2007-02-05接受 *E-mail;wu少ui_gin@ 第7期 吴惠勤等:脂肪酸的色谱保留时间规律与质谱特征研究及其在食品分析中的应用 2.2 月旨肪的提取和甲醋化衍生 准确称取脂肪59，以石油醚为溶剂，用索氏提取法提取出脂肪，挥干溶剂，准确称出总脂肪质量，并 计算出样品中总脂肪的含量。 按文献 1〔0,11〕方法将脂肪酸甘油醋转化为脂肪酸甲醋。取约0.1g提取出的脂肪，置于10mL容 量瓶中，加人1mL乙醚/正已烷，摇匀，然后加入1mL无水甲醇，摇匀，再加人1mL0.8mol/L氢氧化 钾一甲醇溶液，摇动5min，加水至刻度，静置分层，取上层溶液进行GUMS测定。 结果与讨论 3.1 脂肪酸