纳米硒对局灶性脑缺血的保护作用及机制研究.pdf

中国地方病防治杂志 20 17 年1 月第32 卷第1 期 Chin J Ctrl Endem Dis Vol．32 No．1 20 17 ·85 · 纳米硒对局灶性脑缺血的保护作用及机制研究 1 1 2 3 司金春 ，路颜羽 ，陈润都 ，肖志强 1．商丘医学高等专科学校，河南476000 ;2．武警后勤学院救援医学121 专业;3．商丘市第一人民医院 摘要:目的研究纳米硒对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法 用改良线栓法制备大鼠中动脉脑 缺血再灌注模型，随机将 120 只雄性SD 大鼠平均分为假手术组、模型组、纳米硒低、中、高剂量组。脑缺血再灌注24 h 后进行神经功能缺损评分;TTC 染色试验测定脑梗死体积;干湿重法测定脑组织含水量;心脏采血检测血清中SOD、MDA 和NO 含量变化;TUNEL 法检测脑组织神经细胞凋亡情况，Western blot 检测脑组织Bcl－2 和Bax 蛋白表达变化。结果 与模型组相比，纳米硒治疗组脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能缺损症状显著改善，脑梗塞体积和脑水肿程度显著降 低，血清SOD 活性显著提高，MDA 和NO 含量显著降低，脑组织神经细胞凋亡率显著降低，凋亡相关蛋白 Bcl － 2 蛋白表 达水平明显升高，Bax 蛋白表达水平明显降低(P ＜0．05 或P ＜0．01)，且具有剂量依赖效应。结论 纳米硒对大鼠局灶性 脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用，其机制可能与纳米硒能有效改善抗氧化酶活性、提高机体清除自由基能力、抑制 脂质过氧化程度及抑制脑组织神经细胞凋亡相关。 关键词:纳米硒;脑缺血再灌注损伤;超氧化物歧化酶;丙二醛;一氧化氮 中图分类号:Ｒ 743．31 文献标识码:A 文章编号:1001－ 1889 (2017)01－0085－02 硒是人体必需的微量元素之一，具有抗癌、抗氧 和Bax 蛋白表达变化。 化、清除体内自由基、防止细胞损伤及调节免疫等广泛 1．3 统计学分析 采用SPSS 22．0 软件进行数据分析。 ［1，2］ 的生物学功能 。本研究用线栓法构建大鼠脑缺血 2 结 果 再灌注损伤模型，观察纳米硒对大鼠脑缺血再灌注损 伤的保护作用，并对其机制进行探讨。 2．1 大鼠行为学评分 与相比，模型组大鼠均表现出 明显的神经运动功能障碍，术后行为学评分［(3．06 ±0． 1 材料与方法 78)分］显著高于假手术组(0 分)(P ＜0．0 1)，说明造模 1．1 实验材料 雄性健康SD 大鼠，体重250 ～ 300 g ， 成功;与模型组比较，纳米硒低、中、高剂量组大鼠行为 由郑州大学实验动物中心提供。纳米硒购于上海四通 学评分［(2．38±0．61)、(1．59 ±0．53)、(1． 19 ±0．46)分］ 纳米技术港有限公司;红四氮唑(TTC)购于上海钰博 明显低于模型组(P ＜0．05 ，P ＜0．0 1)。 生物科技有限公司;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛 2．2 脑梗死体积与脑含水量 与相比，模型组大鼠脑 (MDA)、一氧化氮(NO)检测试剂盒购于南京建成生 梗死体积与脑含水量［(39． 68 ± 3． 46 )% 、(81． 21 ± 物工程研究所; TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒购于美国 1. 47)%］均显著高于假手术组［0 、(74． 35 ± 1．59 )%］ Promega 公司;组织总蛋白提取试剂盒、BCA 蛋白浓度 (P ＜0．0 1);相比，纳米硒低、中、高剂量组大鼠脑梗死 检测试剂盒购自于上海酶联生物科技有限公司;Bcl － 体积与脑含水量 ［(25．