河南省商丘市草莓根腐病病原菌的分离和鉴定.PDFVIP

植物保护学报Journal of Plant Protection ，2017 ，44 （2 ）：349-350 DOI ：10.13802/ki.zwbhxb.2017.2016141 河南省商丘市草莓根腐病病原菌的分离和鉴定 Isolation and identification of strawberry root rot pathogen in Shangqiu, Henan Province 朱晓琴 宋自力 裴冬丽* （商丘师范学院生命科学学院，植物与微生物互作河南省高校重点实验室，河南商丘476000） Zhu Xiaoqin Song Zili Pei Dongli* （Key Laboratory of Plant-Microbe Interactions, Department of Life Sciences ，Shangqiu Normal University ， Shangqiu 476000 ，Henan Province ，China ） 草莓在我国各地广泛种植，由于大规模连作栽 有限公司；ABI Thermal Cycler 2720 PCR 仪，美国 培，导致草莓病害逐年增加，根部病害尤为严重。草 Applied Biosystems 公司。 莓根腐病是最常见的根部病害，目前已发现的病原 1.2 方法 菌种类有20 多种（张悦丽等，2015 ）。各地草莓根腐 病原菌分离纯化及形态学鉴定：将患病植株根 病病原菌并不相同，如北京市昌平区为立枯丝核菌 部用清水冲洗干净，从病健交界处剪取0.5 cm 长的 Rhizoctonia solani 、胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeo- 小段，放入70%酒精中消毒10 s ，再用2%次氯酸钠 sporioides 、木贼镰刀菌Fusarium equiseti 、尖孢镰刀 浸泡10 min ，无菌水冲洗多次，放入PDA 平板上 菌F. oxysporum （张阳等，2015 ），山东省烟台市为立 28℃培养1周。菌落出现后，用接种环挑取菌落，多 枯丝核菌、尖孢镰刀菌、疫霉菌Phytophthora sp. （胡 次反复培养，最后得到纯化菌株。纯化菌株培养 彦江和张茹琴，2012 ），山东省济南市为终极腐霉 1周后，观察和记录菌落形态、颜色，并在显微镜下 Pythium ultimum （张悦丽等，2015 ）等。河南省商丘 观察菌丝和分生孢子的形态等，对菌丝直径和分生 市素称“草莓之乡”，但草莓根腐病发生频繁，严重时 孢子大小、分隔情况各统计50 个视野，对病原菌进 减产50%以上甚至绝收。目前对该地区草莓根腐病 行初步的形态鉴定。 的研究和防治还未见报道。本试验采用形态鉴定和 病原菌致病性检测：按照柯赫氏法则进行。将 6 rDNA 内转录间隔区序列（internal transcribed spac- 以上纯化菌株制备成10 个/mL 的孢子悬浮液，采用 er ，ITS ）分析河南省商丘市草莓根腐病的病原菌，以 灌根法侵染健康草莓根系，10个重复，对照组用无 期为该地区草莓根腐病的防治提供理论依据。 菌水代替。28℃培养1周，待其发病后，对地上部和 1 材料与方法 地下部的发病情况进行统计。并对患病根部再次进 1.1 材料 行分离纯化，将得到的菌株重新接种，检测2 次接种 供试植株：2015 年10月于河南省商丘市双八镇 后的植株发病情况是否相同，再次对病原菌进行初 代庄连作2 年的草莓大棚采集重病株带回实验室备 步的形态鉴定。 用，草莓品种为丰香。通过田间自然感病和人工接 病原菌分子鉴定：采用改良CTAB 法提取菌