1.1 DNA重组技术的基本工具.ppt

角似鹿 鼻似狮 目似虎 唇似牛 爪似鹰 麟似鱼;基因工程：;;思考：;;1．限制性核酸内切酶——“分子手术刀”;思考：;3．产物：用限制性核酸内切酶切割形成的 DNA 片段末端有两种形式,即黏性末端和平末端。;(2)平末端： 是限制性核酸内切酶在识别序列的中心轴线处切开时形成的。如下图所示：;【例1】下列关于限制酶的说法正确的是（ ）;2．DNA 连接酶——“分子缝合针”。;基因的针线——DNA连接酶;与 DNA 分子相关的酶;;;DNA 连接酶——“分子缝合针”;例3：下列关于 DNA 连接酶的叙述中，正确的是（ ）;例4：下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（ ） A．①②③④ B．①②④③ C．①④②③ D．①④③②; (1)种类：________、λ噬菌体的衍生物、动植???病毒 (2)质粒的本质：小型环状双链 DNA。;1．作用：;3．种类：;【配对练习1】在基因工程中，切割运载体和含有目的基; 【例3】下列哪项不是基因工程中经常使用的“分子运输车”（ ）;4．质粒作为“分子运输车”的条件是（ ） ①能够自我复制　②双链环状DNA分子　③有多个限制酶切点　④有标记基因　⑤真核细胞中没有 A．①②③④⑤　　 B．①②③④ C．①③④ D．②③⑤ ;例5】下列关于基因工程中所选用的质粒的说法，错误的是（ ）;例6：已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如下图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是 (　　);【例7】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：;(1)一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含________个游离的磷酸基团。 (2)若对图中质粒进行改造，插入的Sma Ⅰ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________。 (3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是________________;(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_____________酶。