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抗体工程 (Immune Engineering) 第一节 单克隆抗体 淋巴细胞杂交瘤产生单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体？ 单克隆抗体的概念： 由单个杂交瘤细胞进行无性繁殖,也就是通过克隆，形成细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 杂交瘤细胞的筛选(1) 骨髓瘤细胞：为HGPRT基因缺陷型细胞，不能合成DNA。需经应急途径合成DNA。HAT培养基含有次黄嘌呤，氨基喋呤和胸腺嘧啶。氨基喋呤可阻断骨髓瘤细胞的应急DNA合成。所以骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中生长存活. B淋巴细胞具有HGPRT基因但不能在体外生长。 利用这两种细胞各自的特点，筛选能在体外含HAT的培养基中生长的融合子。 杂交瘤细胞的筛选(2) 鉴定后的杂交瘤细胞可大规模培养，收集上清提取单克隆抗体，也可免疫小鼠腹腔，抽取腹水来制备相应的McAb，但生产规模和产量均受限制。 单克隆抗体的优势 1．高特异性，针对一个抗原靶点。。 2．高纯度，成份均一，来自一个克隆。 3．高效价，抗体的滴度高。 4．高效益，国际上近100亿美元市场。 5．易制备。 6．前景好，McAb 1995问世后，风糜全球，寄予厚望。 单克隆抗体应用领域 1．McAb作为诊断试剂应用： 这是目前应用最广的领域，目前已有许多成套的诊断试剂盒在诊断传染病，代谢病和免疫性疾病中应用，取