拟南芥雄性不育突变体+,($-.+--$,0--)候选突变-上海师范大学学报.PDF

第 卷第 期 上海师范大学学报 自然科学版 年 月 拟南芥雄性不育突变体 候选突变基因的克隆 庞朝廷 张婷 李 娜 吴文艳 高菊芳 上海师范大学 生命与环境科学学院上海 摘要 在插入突变体 株系的群体中筛选到两株雄性不育突变体对 序列上的一对引物进行鉴定结果表明其基因组中没有插入遗传分析表 明这两株雄性不育突变体由同一单个隐性基因控制引起不育的主要原因是从花药发育的第 期开始小孢子细胞质内容物逐渐减少直至消失到花药发育的第 期药室内的小孢子只 剩下一个花粉壁空壳故该突变体命名为 利用图位克隆的方法对 基因进行了定位结果表明基因位于第二条染色体上分子标记 和 之间的 区间内该区间内一共有 个基因注释通过克隆区间内的基因并测序发现 突变 体基因组中 基因编码序列的外显子在第 和第 个碱基之间插入了一个碱 基而 突变体基因组中 基因编码序列的外显子在第 和第 个碱基之间 插入了一个 碱基造成的编码序列移码使第 至第 碱基成为终止密码子故 是编码的候选基因 关键词 拟南芥 雄性不育 花粉壁空壳 图位克隆 中图分类号 文献标志码 文章编号 引言 植物雄性不育是指植物在有性繁殖过程中不能产生正常的花药花粉或雄配子的遗传现象 按世代交替把雄性不育划分为孢子体不育和配子体不育两种类型孢子体不育指花粉育 性受孢子体植株基因型控制表现为纯合突变体不能产生种子而配子体不育是指花粉育性直接受 雄配子体花粉本身基因型控制表现为杂合突变体花粉缺陷比率 而无法产生纯合突变体 花粉在花药中的发育过程涉及一系列复杂而精细的分子机制包括早期的细胞分化和命运决定减 数分裂花粉壁形成以及花粉细胞核有丝分裂等等 等 基因与早期的细胞分化和命运决定相关 等基因 的功能分别涉及染色体的黏着配对联会重组分离和胞质分裂等关键过程 花粉壁发育的分子 机制极其保守主要涉及胼胝质壁的合成初生外壁的形成以及花粉外壁和花粉内壁形成等 研究发 现 和 等基因与花粉壁的正常发育相关 进一步的研究还 收稿日期 基金项目 国家自然科学基金 上海师范大学大学生创新项目 通信作者 高菊芳中国上海市徐汇区桂林路 号上海师范大学生命与环境科学学院邮编 第 期 庞朝廷张婷李娜等拟南芥雄性不育突变体 表明在绒毡层发育过程中遗传通路 负责花粉外壁外层的形成 负责花粉外壁内层的形成 小孢子从四分体中释放出来之后除了形成花粉壁之外其细胞核还要经历两次有丝分裂细胞质 还需积累营养物质才能形成成熟的花粉粒然而哪些基因控制着这些过程仍不清楚本文作者报道的 是从 株系的群体中筛选到的由单个隐性基因控制的拟南芥雄性不育突变体其花粉壁发 育基本正常但从花药发育的第 期开始小孢子细胞质内容物逐渐减少直至消失到花药发育的第 期药室内的小孢子只剩下一个花粉壁空壳故该突变体命名为 利用图位克隆的 方法克隆了候选基因测序结果表明突变体基因组中 基因编码序列的外显子部分有一 个单碱基插入造成编码序列提前出现终止密码子故 是编码的候选基因该基因可能 参与小孢子的后续发育 材料与方法 植物材料 拟南芥 分别以和为遗传背景拟南芥雄性 不育突变体 和 从 中分离获得背景为 方法 等位分析 以 代为父本 为母本或者 代为父本 为母本杂交