成年小鼠心肌细胞的分离培养及鉴定.pdfVIP

维普资讯 2007年 6月 中国实验动物学报 June，2007 第 l5卷 第 3期 ACTA LABORAToRIUM ANIMALISSCIENTIA SINICA Vo1．15 No．3 、 、 、! 、e 研究报告 ； 、睹 、 成年小 鼠心肌细胞的分离培养及鉴定 王丽娟，贾大林，齐 国先 (中国医科大学第一 临床学 院循环内科 ，辽宁 沈 阳 110001) 【摘要】 目的 探讨成年小鼠心肌细胞分离培养的方法，评价心肌细胞的存活状况。方法 应用改 良 Langendorff方法进行成年小 鼠心脏灌流 ，分离并培养心肌细胞 ，评价杆状心肌细胞 的比例变化。台盼蓝染色判定 心肌细胞活力，应用毒胡萝 素 (thapsigargin)治疗心肌细胞 24h后 ，WST方法测定细胞生存率 。结果 在每个成 年小 鼠心脏分离 了4o一60万的心肌细胞 ，台盼蓝染色结果 68％为存活心肌细胞。心肌细胞培养 1h、24h及48h 后，杆状心肌细胞的比例分别为70％、50％及30％。心肌细胞生存率随着毒胡萝 卜素浓度的增加逐渐减低，其中1、 5及 10 mol／L毒胡萝 卜素的生存率明显低于对照组 (P0、05，P0．01)。结论 应用改 良Langendorff方法及严格 控制心脏灌流培养 的条件，可 以成功地分离培养成年小 鼠心肌细胞 ，有助于进行细胞分子水平 的研究 。 【关键词】 成年小鼠心肌细胞 ；细胞分离，培养 ；鉴定 【中图分类号】R332 【文献标识码】A 【文章编号】1005．4847(2007)03．0175．04 Isolation，CultureandIdentificationofCardiomyocytesfrom AdultM ice WANGLi·juan，JIADa-lin，QIGuo·xian (DepartmentofCardiology，TheFirstClinicalCoUege，ChinaMedicalUniversity，Shenyang110001，China) A【bstract】 Objective Toestablishamethodtoisolate，cultureandidentifyeardiomyocytesfromadultmice，and evaluatetheviba ility0fculturedeardiomyocytes．M ethods A mod ifiedLangendorffmodelofheartwasestablishedusingC57BL／ 6Jmice．Cardiomyocyteswereioslatedandcultured．Rodshapedmyocytesratewasdetermined．Theeardiomyocytesviabilitywas evaluatedbytrypanbluesatining，and the survival rateofcardiomyocytesa