毛细管电泳电致化学发光法测定人尿中脯氨酸与羟脯氨酸.pdf

第77 卷 分析化学 （T=6UJ )VKUV= ） 研究报告 第3 期 -%%5 年3 月 WHPDRD X/?9PB0 /Y KPB0:ZHNB0 WD.HRZ9: #+5 , #++ 毛细管电泳! 电致化学发光法测定人尿中脯氨酸和羟脯氨酸 # 薛 静 梁 恒 李 甜 武亚艳 （西安交通大学生物医学信息工程教育部重点实验室，分离科学研究所，西安# $%%’ ） 摘 要 采用毛细管电泳!联吡啶钌电致化学发光法检测了人尿中的脯氨酸和羟脯氨酸。讨论了联吡啶钌浓 度、检测电位、磷酸盐缓冲液浓度和() 值、进样电压和进样时间等实验条件对脯氨酸和羟脯氨酸分离检测的 影响。在优化实验条件下，脯氨酸和羟脯氨酸分别在% * %%+ , - 和% * %$ , - ../01 2 范围内呈良好线性（相关 系数% * ’’# ）；检出限浓度分别为- 和 !./01 2 。测定了人尿中游离脯氨酸和羟脯氨酸以及两者总浓度，回收 率’3* 4 , ’’ * #4 。 关键词 脯氨酸，羟脯氨酸，毛细管电泳，电致化学发光，联吡啶钌 ! 引 言 胶原蛋白中常含有丰富的脯氨酸（89/ ）和羟脯氨酸（):( ），其中):( 几乎为胶原蛋白所特有。在胶 ［$］ 原蛋白代谢中，89/ 通过羟基化形成):( ，胶原蛋白降解释放的):( 从尿中排泄 。尿):( 已作为人体 胶原蛋白代谢的生化指标。人体液 ［- ］ ［7 ］ 89/ 和):( 含量变化与多种疾病有关，如骨病 、癌症 和慢性尿毒 症［ ］等，因而同时检测尿89/ 和):( 具有重要的临床诊断价值。尿89/ 和):( 以游离态和结合态两种 形式存在，可直接测定尿中游离9/ 和):( 。通过样品处理、水解尿蛋白后，还可测定尿中游离态和水 解的89/ 和):(（简称为总89/ 和):( ），这有助于为全面诊断病情提供参考。传统检测89/ 和):( 的方 ［5 ］ ［3 ］ 法有气相色谱法（; ） 和液相色谱法（)82 ） ，但存在耗时、成本高和色谱柱易污染等缺点。 毛细管电泳（ - A = ）分离!联吡啶钌［?（@(: ） ］电致化学发光（=2 ）检测是近年来发展的一种新方 7 法（简称=!=2 ）。)B9CD: 在$’-’ 年首次成功地观察到了碱性水溶液中鲁米诺的=2 ，但直到$’+# - A ［# ］ 年才发现?（@(: ） !烷基胺的=2 强度与胺的结构有关，并开始用于分析化学 ；$’’# 年EFDDG0D9 7 ［+ ］ - A ［’ ，$% ］ 等 最早把= 与?（@(: ） !=2 结合检测了 !受体阻断剂。近年，2H? 等 在=!=2 接口、整体 7 ! 仪器开发和应用方面做许多创新性工作。该法不仅具有= 的快速高效分离、样品用量少等特点，又发 挥