互叶醉鱼草无性系建立的研究.pdfVIP

互叶醉鱼草无性系建立的研究 李世国 姜长阳 （辽宁师范大学生命科学学院， 大连 116029） lishig@126.com 摘 要：本实验对互叶醉鱼草无性系建立和植株再生进行了研究，成功诱导了丛生不定芽和 植株生根并移栽成活.实验发现，诱导愈伤组织的理想培养基是 MS+6-BA0.2+2,4-D0.8；诱 导互叶醉鱼草愈伤组织分化芽的理想培养基是 MS+BA0.5mg/L；诱导植株生根的最佳培养基 是 1/2MS+NAA0.3mg/L；移栽或扦插的理想基质是炉灰渣。 关键词：互叶醉鱼草 无性系 植株再生 互叶醉鱼草（Buddleja alterifolia Maxim ）又称千层皮，属于马钱科醉鱼草属植物， 主要分布于山西、陕西、甘肃、宁夏、内蒙古等我国的西北地区的干旱、半干旱地带的山坡 地带。原产地为贺兰山、黄土高原，贺兰山东西两侧也均有分布。生于海拔 1300-2500m的 黄土丘陵、干旱山坡、山沟砾石滩地等处[1,2]。互叶醉鱼草在祁连山东端天祝藏族自治县祁 连林场境内，海拔 2200m的阳坡沟壑和河谷石崖岩缝中呈簇状或团块状天然小片林分布。生 长地带坡向为南坡或东南坡,坡度为25 度～35 度，年降水量 350mm以内,平均气温 5℃,无霜 期 120d左右,气候干旱多风,空气湿度小,土层很薄甚至岩石裸露,生长条件很差。但是,互叶 醉鱼草却生长茂盛。因为互叶醉鱼草具有耐旱、抗寒、耐高温、耐盐碱，无病虫害,适应性 很强的特点，不仅使其成为干旱地区保持水土的优良树种，而且也被城市的庭院、花园、街 道等引种，进行绿化观赏栽培[3-5]。目前生产中使用的互叶醉鱼草多是由种子繁殖而来，但 是，由于种子不易获得。并且实生苗具有生长周期长、长势不整齐等问题，难以满足人们绿 化观赏栽培的需要[6]。为此，我们对互叶醉鱼草进行了组织培养及无性系建立的研究，以期 解决生产上的问题。现报道如下。 1 材料与方法 1.1 材料 试材为互叶醉鱼草（Buddleja alterifolia Maxim ）嫩茎。 1.2 方法 将互叶醉鱼草的嫩茎剪成 3cm的段,置于 500ml的广口瓶中,用自来水冲洗 3 遍后，将广 口瓶移至超净工作台上，加入约 30ml 70﹪酒精，振荡灭菌大约 10s后倒出，用无菌水漂洗 2 次，然后再加入 0.05﹪ HgCl2 溶液，灭菌 1min，再加入等体积的无菌水，振荡灭菌约 12min 后，将灭菌液体倒出，再用适量的无菌水，振荡洗涤 4～5 次，取出后将无菌茎切成约 1cm 的段，接种培养基。 培养条件:基本培养基为 MS 或1/2MS,附加不同浓度的 BA、NAA、2,4-D或 IAA，MS 加蔗 糖 30g/L,1/2MS 为 15g/L,培养的温度保持 25℃左右，光照 2000～3000lx,10h/d,培养基的 pH5.8～6。 2 结果 2.1 愈伤组织诱导 将互叶醉鱼草的无菌苗嫩茎，接种到含有不同浓度的 6-BA、NAA、2,4-D 的MS 培养基上。 培养 25d 时有的材料在下端切口处出现稍许的膨大，60d 时生长快材料能诱导形成直径 1cm 1 左右愈伤组织。由表 1 可见，不同浓度、不同种类的激素，对愈伤组织的诱导具有不同影响。 在不加任何激素和只加 6-BA 的培养基上，不能诱导嫩茎形成愈伤组织；在加入 6-BA，同时 又加入 NAA或 2,4-D 的培养基中，可以诱导形成愈伤组织。其中在培养基中加入 2,4-D 的诱 导率明显地高于加入 NAA 的培养基。观察还表明，含有 2,4-D 的培养基，不仅愈伤组织的诱 导率较高，而且愈伤组织的长势也好于含有 NAA 的培养基。观察还表明，在 6-BA 浓度为 0.2 mg/L(以下单位同，略)、2,4-D 浓度为 0.8 的MS 培养基上，不仅愈伤组织的诱导率较高， 而且所诱导的愈伤组织为绿色颗粒状、具有分化能力。这说明 MS+6