血管紧张素转换酶2基因转染对人内皮细胞MIF表达影响.pdfVIP

圄痘理生理 圭 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(10)：1922—1926 [文章编号] 1000—4718(2008)10—1922—05 血管紧张素转换酶2基因转染对人 内皮 细胞 MIF表达的影响术 钟久昌 ， 余细勇 ， 郭俊明 ， 林秋雄 ， 龚朝辉 ， 刘 琼 (宁波大学医学院分子高血压病研究室，生物化学与分子生物学研究所，浙江 宁波315211； 广东省人民医院医学研究中心，广东 广州 510080) [摘 要] 目的：探讨重组血管紧张素转换酶2(ACE2)基因转染对体外培养的人血管内皮细胞中由血管紧 张素(Ang)II诱导的巨噬细胞移动抑制因子 (MIF)表达的影响。方法：克隆和构建含人ACE2基因全长的重组质 粒 (pACE2)，并将之转染人人血管内皮细胞中。分别采用实时定量 PCR和Western印迹技术检测转染细胞中的 MIFmRNA与蛋白表达情况。结果：AngII(100nmo~L)和AngIV(100nmo~L)刺激后均可诱导人血管内皮细胞 中MIFmRNA及蛋白表达增加 (P0．01)。pACE2基因转染可明显抑制 内皮细胞中由AngII和AngIV诱导的 MIFmRNA和蛋 白表达(P0．05)。结论：ACE2基因过表达可明显抑制人 内皮细胞中炎症介质MIF的表达，提示 ACE2基因具有一定的抗炎症效应。通过调节ACE2基因的活性和表达，很可能为炎症相关疾病如动脉粥样硬化 治疗提供新的策略。 [关键词] 血管紧张素转换酶2；巨噬细胞游走抑制因子；血管紧张素I1；炎症 【中图分类号】 R363 [文献标识码】 A Effectsofangiotensin-—convertingenzyme2 genetransfection on theex-· pression ofmacrophagemigration inhibitoryfactorinhuman endothelial cells ZHONGJiu—chang一，YUXi—yong，GUOJun—ming，LINQiu—xiong，GONGZhao — hui．LIUQiong (。MolecularHypertensionResearchLaboratory，InstituteofBiochemistryandMoelc~arBiology，NingboUniversitySchoolof Medicine，~ngbo315211，China；ResearchCe~erofMedcialSciences，GuangdongPr~inclPeopelsHospital，Guang- zhou510080，China．E—mail：jiuchangzhong@yahoo．corn．crt) [ABSTRACT] AIM：Toimploretheeffectsofrecombinantangiotensin— convertingenzyme2(ACE2)gene transfectionontheexpressionofmacrophagemigrationinhibitoryfactor(MIF)inducedbyangiotensin(Ang)IIincultured humanendohtelialceils．METHODS：ArecombinantplasmidencompassinghumanACE2gene(pACE2)Wasconstructed andtransfeetedintohumna endothelialcelis．Endothelialcellswerestimulatedwi山 AngIIorAngIV inhtepresenceand absenceofpACE2gene~ansofr．ThemRNA andproteinlevelsofMIFinendothelial cellsweredeterminedbyreal—time PCR nadWesternblotting，respe