雅致枝霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和在酿酒酵母中的表达.pdfVIP

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2017-05-31 发布于北京
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雅致枝霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和在酿酒酵母中的表达.pdf

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卷期 ! # 微生物学报 !（）： # ! ’ ( 年月日 $%% $ ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! )*+,-.,/ $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! ! 雅致枝霉脂肪酸脱氢酶基因的克隆 ! 及在酿酒酵母中的表达王德培，李明春，魏东盛，张颖慧，邢来君（南开大学微生物系天津市微生物功能基因组学重点实验室天津 0%%%#）摘要：根据真菌脂肪酸脱氢酶基因保守的组氨酸区和区附近保守序列设计兼并引物进行，得到 !5 # D35EFD 雅致枝霉（）脂肪酸脱氢酶基因部分序列，然后通过快速扩增末端 !#$%’($ )*)+#%, GB0 H$1%!5 !2(+I @JKG @JKG 技术（）向两端延伸得到的脂肪酸脱氢酶基因全长序列。序列分析表明有一个、编码 DGF7 #2%!+I !5 @JKG #0+I 个氨基酸的开放阅读框。推测的氨基酸序列与已知其他真菌的脂肪酸脱氢酶基因的氨基酸序列比 !2( 37J !5 对，具有个组氨酸保守区、个疏水区及末端细胞色素融合区。将此编码区序列亚克隆到酿酒酵母缺陷型 0 $ K +2 菌株LKMN@# 的表达载体 IO7N$ H% 中，构建表达载体 IO37J，并在酿酒酵母 LKMN@# 中异源表达。通过气相色谱（）和气相色谱质谱（）分析表明，该序列在酿酒酵母中获得表达，产生亚麻酸（）的含量占酵母总脂 PF Q PF5RN 5 PSG $ 肪酸的。证明此序列编码的蛋白能将外加的亚油酸转化为亚麻酸，是一个新的有功能的脂肪酸脱氢酶